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アブラナ科植物の自家不和合性に関わる情報伝達因子の同定と解析

十字花科植物自交不亲和相关信号因子的鉴定与分析

基本信息

批准号：
06F06180
负责人：
高山誠司
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Nara Institute of Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06F06180/
关键词：
植物生殖アブラナ科自家不和合性キナーゼシロイヌナズナ

项目摘要

アブラナ科植物の自家不和合性機構解明を目的に、以下の2つの方向から研究を進めた。1.膜アンカー型細胞質キナーゼMLPKの機能解析自家不和合性の情報伝達の鍵因子である膜アンカー型キナーゼMLPKと相互作用する柱頭蛋白質を、酵母two-hybrid法の改良型のDUALmembraneシステムを用いて探索した。9.1×10^6クローンの中から、相互作用因子候補50個を選択した。さらに植物細胞内でMLPKと相互作用するかどうかをBiFC法により確認し、6個の有力候補を絞り込んだ。この内3個が細胞内小胞輸送に関係する因子であり、自家不和合性反応と小胞輸送の関連が示唆された。2.不稔性シロイヌナズナ変異株の探索当初は正遺伝学の手法により初期受粉過程で機能する遺伝子を探索することを計画したが、上記他の解析により受粉反応や自家不和合性反応に関わると予測される因子の候補が多数得られてきたことから、先にそれらの機能解明を目的とする新手法の確立が急務となってきた。特に生存に必須の因子については、タグライン解析等では受粉過程への関与を証明できないという問題が生じてきた。そこで、形質転換法により自家不和合性を付与しうるシロイヌナズナ系統を対象に、逆遺伝学の要素を含むTILLING法によるスクリーニング系を確立することにした。EMS処理した種子より4,000個体のM1株を生育させ自殖種子を得た。現在、本研究を引き続き、約3,500個体のM2株についてゲノムDNAのサンプリングを進めている。

To clarify the purpose of the study on the incompatibility and sexual mechanism of the plants in the family, the following two directions are proposed. 1. The function of membrane type MLPK is analyzed by the key factor of self-incompatibility and information transmission. The modified DUAL membrane system of yeast two-hybrid method is explored by the key factor of membrane type MLPK interaction 9.1×10^6 interaction factor candidates 50 candidates Moreover, MLPK and interactions in plant cells can be confirmed by the BiFC method, and six powerful candidates are available. These three factors are related to intracellular vesicle transport, self-and sexual vesicle transport. 2. In order to explore the characteristics of different plants, we should establish a new method to solve the problem of the initial pollination process, the function of the initial pollination process, and the function of the initial pollination process. Special factors necessary for survival, such as the analysis of the pollen process, and the proof of the problem. For example, in the case of the physical transformation method, it is necessary to establish the physical transformation system. EMS treatment of 4,000 individuals from M1 plants In this study, about 3,500 individuals of M2 strains were selected for further study.