プロテオーム解析によるネオスポラ原虫の分泌タンパク質の網羅的同定とその応用

蛋白质组分析综合鉴定新孢子虫原生动物分泌蛋白及其应用

• 批准号: 06F06225
• 负责人: 玄 学南
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06F06225/
• 关键词: Neospora caninum; プロテオーム; 分泌タンパク質; 抗原タンパク質; 薬剤標的分子; 組換えワクチン; 薬剤標的; MALDI-TOF-MS; 抗原虫薬

本研究ではプロテオーム解析手段を用いた、ネオスポラ原虫の宿主細胞への吸着・侵入に関わるタンパク質の網羅的同定と新規ワクチン・薬剤標的分子の発掘を目的として実施した。本年度に実施した研究内容と得られた研究成果は以下の通りである。ネオスポラ原虫虫体を溶解し、2-DEにて展開した後に、銀染色により全タンパク質を可視化したところ、約620種類以上のタンパク質スポットが検出された。さらにネオスポラ原虫感染血清を用いて当該虫体タンパク質についてイムノブロットを行ったところ、約80種類以上の抗原スポットが検出された。これらのタンパク質スポット中、61種類の抗原スポットを含む150種類のタンパク質スポットについてMALDI-TOF-MSによるタンパク質同定を試みた。その結果、約57種類のタンパク質の同定に成功した。そのうち、16種類は公共のデータベースに登録されたネオスポラ原虫のゲノム情報により同定できた。例えば、NcSAG1・NcSRS2・NcMAG1などの虫体膜タンパク質;NcMIC1・NcMIC3・NcAMA1・NTPaseなどのマイクロネーム由来タンパク質;NcGRA2・NcGRA7などのデンスグラニュー由来タンパク質;NcSUB・NcPO・NcHSP70などその他のタンパク質が挙げられる。これらのうち、約10種類のタンパク質はネオスポラ原虫と近縁なトキソプラズマ原虫(人獣共通感染症を引き起こす)との交差抗原として同定された。例えば、NcHSP70・NcAMA1・NcP0に対する特異抗体は、ネオスポラ原虫だけでなくトキソプラズマ原虫の宿主細胞への侵入も阻害することから、これらの抗原は両原虫感染症に対する共通ワクチン候補であることが示唆された。

The aim of this study is to develop new methods for the identification and identification of target molecules in host cells. This year's research results are as follows: After 2-DE development, silver staining was used to visualize more than 620 species of protozoa. More than 80 kinds of antigens were detected when the parasite was infected with serum. 61 kinds of antigen, including 150 kinds of antigen, were identified by MALDI-TOF-MS. The results show that about 57 kinds of samples were successfully identified. The 16 categories are listed in the list below. For example, NcSAG1·NcSRS2·NcMAG1·NcMIC 1·NcAMA1·NTase 1·NcMIC3·NTase 1·NTase 1·NTase There are about 10 species of protozoa, including protozoa, protozoa, and protozoa. For example, NcHSP70·NcAMA1·NcP0 is a specific antibody against protozoa and its host cells. It is a common candidate for protozoan infection.

项目成果

Genetic characterization of GRA6 genes from Toxoplasma gondii from pigs in Okinawa, Japan

• DOI: 10.1292/jvms.68.1105
• 发表时间: 2006-10-01
• 期刊: JOURNAL OF VETERINARY MEDICAL SCIENCE
• 影响因子: 1.2
• 作者: Zakimi, Satoshi;Kyan, Hisako;Fujisaki, Kozo
• 通讯作者: Fujisaki, Kozo

Proteomic analysis of calcium-dependent secretion in Toxoplasma gondii

弓形虫钙依赖性分泌的蛋白质组学分析

• 发表时间: 2007
• 期刊: Proteomics 7
• 作者: Kawase;O.;Nishikawa;Y.;Zhang;H.;Zhang;G.;Bannai;H.;Jin;S.;Lee;E. G.;Xuan;X.
• 通讯作者: X.

Identification of a protein disulfide isomerase of Neospora caninum in excretory-secretory products and its IgA binding and enzymatic activities.

• DOI: 10.1016/j.vetpar.2006.02.029
• 发表时间: 2006-06
• 期刊: Veterinary parasitology
• 影响因子: 2.6
• 作者: M. Liao;Liqing Ma;H. Bannai;Eung‐goo Lee;Z. Xie;Xiaofei Tang;Houshuang Zhang;X. Xuan;K. Fujisaki

Proteomic approach to identfy antigenic proteins of ovine toxoplasmosis.

鉴定绵羊弓形虫病抗原蛋白的蛋白质组学方法。

• 发表时间: 2007
• 作者: Lee;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Identification of ribosomal phosphoprotein P0 of Neospora caninim as a potential common vaccine candidate for the control of both neosporosis and toxoplasmosis

鉴定犬新孢子虫核糖体磷蛋白 P0 作为控制新孢子虫病和弓形体病的潜在通用候选疫苗

• 发表时间: 2007
• 期刊: Mol. Biochem. Parasitol. 153
• 作者: Zhang;H.;Lee;E. G.;Liao;M.;Comaore;M.;Zhang;G.;Kawase;O.;Fujisaki;K.;Sugimoto;C.;Nishikawa;Y.;Xuan;X.
• 通讯作者: X.