皮膚リーシュマニア症の分子免疫診断法、ワクチンおよび免疫療法の開発

皮肤利什曼病分子免疫诊断方法、疫苗和免疫疗法的开发

• 批准号: 06F06242
• 负责人: 橋口 義久
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: Kochi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06F06242/
• 关键词: 皮膚リーシュマニア症; 粘膜皮膚リーシュマニア症; 分子診断法; ワクチン; 免疫療法; MPS-PCR; Leishmania; アルゼンチン; リーシュマニア原虫; 多座位酵素免疫電気泳動; アマスチゴート; マクロファージ; 細胞膜表面抗原

研究目的:皮膚リーシュマニア症の分子診断法を開発するとともに、本症のワクチン並びに免疫療法に適した候補抗原分子の検索を試みる。研究実施計画:アメリカ型皮膚リーシュマニア症の診断及び病因原虫種の確定を行なう上で、modified polymorphism-specific polymerase chain reaction(MPS-PCR)(改良型種特異的多型PCR)の有用性について、種々の病型(a.粘膜皮膚型、b.単純型、c.多数病変型、d.播種型等)の患者検体を用い、従来の2法(Smear法およびLeishmanin skin test)と比較検討した。検討材料として南米アルゼンチン北部の本症流行地患者の皮膚生検材料63検体を用いた。具体的研究内容:1)従来の上記各2法とMPS-PCRの併用は診断率を向上させ、特にSmear法との併用は高い診断率を示した。2)MPS-PCRはアメリカ型皮膚リーシュマニア症の診断率を向上させ、その向上率は最も重篤な病型とされている粘膜皮膚型リーシュマニア症において顕著であった。3)アルゼンチンに分布するLeishmania (Viannia) braziliensis(今回の検体の90.3%)は上記a,b,c,dの全病型に関与しているが、L. (V.) panamensis(同3.2%)はb病型、L. (V.) guyanensis(同6.5%)はc病型に関与していることが判明した。また、MPR-PCRはこれら原虫種の迅速診断・同定に有用であった。研究の意義・重要性:皮膚リーシュマニア症の臨床的治癒後長期間を経て皮膚粘膜に転移する粘膜皮膚型は重篤でよりその確定診断は極めて困難である。本研究は粘膜皮膚型の診断率を向上させた点で意義深い。また、使用抗原の解析結果では将来のワクチン並びに免疫療法の候補抗原として有用であることが示唆された。

研究目标：开发一种针对皮肤利什曼病的分子诊断方法，并试图寻找适合疫苗的候选抗原分子和该疾病的免疫疗法。研究实施计划：修饰多态性特异性聚合酶链反应（MPS-PCR）（改善物种特异性的多态性PCR PCR）与常规两种方法（涂片方法和利什曼蛋白皮肤测试）使用各种疾病类型的患者样本（a。MucosalSkiny type，b。SimpleType，B。Simpletype，c。多重LESION类型，dissem type，dissem dissem，d。dissem，d。dissem，d。dissem，d。dissem，d。dissem，d。dissem，d。dissem，d。dissem，d。dissem，d。作为研究材料，使用了南美洲阿根廷北部地区流行病患者的63例皮肤活检。具体研究详细信息：1）上述两种方法和MPS-PCR的组合提高了诊断率，尤其是涂片方法的组合显示出很高的诊断率。 2）MPS-PCR提高了美国皮肤利什曼病的诊断率，并且在粘膜皮肤利什曼病中的改善率很明显，这被认为是最严重的疾病。 3）在阿根廷分布在阿根廷的利什曼尼亚（Viannia）巴西（本研究样本中的90.3％）参与了所有疾病A，B，C，C和D类型，而L.（V。）Panamensis（3.2％）（3.2％）与疾病类型B，以及L.（V.）gyanensis（V.）Gyanensis（6.5％）涉及疾病类型C中。此外，MPR-PCR可用于快速诊断和鉴定这些原生动物。这项研究的意义和重要性：在长期临床愈合皮肤利什曼病后，可转移至粘膜膜的粘膜皮肤真皮形式很严重且难以诊断。这项研究的意义是，它提高了粘皮肤皮肤类型的诊断率。此外，使用的抗原的分析结果表明，它们可作为未来疫苗和免疫疗法的候选抗原。

项目成果

リーシュマニア症-戦乱が拡げる黒熱病流行-。別冊医学のあゆみ

利什曼病 - 通过战争传播的黑热病流行病。

• 发表时间: 2006
• 作者: Matsumoto T.;et. al.;橋口 義久
• 通讯作者: 橋口 義久

The identification of sandfly species, from an area of Argentina with endemic leishmaniasis, by the PCR-based analysis of the gene coding for 18S ribosomal RNA

• DOI: 10.1179/136485907x156988
• 发表时间: 2007-04-01
• 期刊: ANNALS OF TROPICAL MEDICINE AND PARASITOLOGY
• 作者: Barroso, P. A.;Marco, J. D.;Hashiguchi, Y.
• 通讯作者: Hashiguchi, Y.

Are cytochrome b gene sequencing and polymorphism-specific polymerase chain reaction as reliable as multilocus enzyme electrophoresis for identifying Leishmania spp. from Argentina?

细胞色素 b 基因测序和多态性特异性聚合酶链式反应与多位点酶电泳一样可靠，可用于鉴定利什曼原虫属。

• 发表时间: 2006
• 期刊: American J. Tropical Medicine and Hygiene 75・2
• 作者: Song;Q.G;Lu;C;Hayakawa;K;Lin;J-M.;田中孝尚・能城修一・池田博;Hashizume M;Jorge D. Marco
• 通讯作者: Jorge D. Marco

Establishment of a Mass Screening Method of Sand Fly Vectors for Leishmania Infection by Molecular Biological Method

分子生物学方法建立利什曼原虫感染白蛉载体大规模筛查方法

• 发表时间: 2007
• 期刊: Am.J.Trop.Med.Hyg 77
• 作者: Hirotomo Kato;et. al.
• 通讯作者: et. al.

エクアドルにおけるサシチョウバエの遺伝子タイピング法の確立

厄瓜多尔白蛉基因分型方法的建立

• 发表时间: 2007
• 作者: 寺山好美;他
• 通讯作者: 他