表皮バリア構築におけるケラチノサイト分化関連蛋白質(Kdap)の動態に関する研究

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ケラチノサイト分化関連蛋白質Kdapの表皮角質層構築における役割を検討するため、生体外において表皮構築を再現した三次元培養システムが必要と考えた。犬株化ケラチノサイトCPEKを半気相状態にて培養した結果、形態学的に極めて表皮に類似した角質層を形成することに成功した。免疫組織化学染色において発現蛋白質を検討したところ、角化関連蛋白質であるロリクリンの発現が生体の表皮と同様に角質層の直下に認められた。さらに、Kdapの発現も同様に検討した結果、角質層の直下の表皮と同様の位置に認められた。これらのことから、CPEKを用いた三次元培養システムは極めて表皮に類似した角質層を形成していると考えられ、Kdapの角質層構築へ影響を評価する上で有用と考えられた。そこで、この培養システムを用い、CPEKのKdap発現をmicro RNAによりノックダウンしたときの角質層構築への影響を評価した。その結果、KdapをノックダウンしたCPEKの角化層は対象のものと比較して明らかな肥厚が認められた。角質層の肥厚はケラチノサイトの剥離が抑制されたときに起こると考えられ、本研究における角化層の肥厚においても、直接的あるいは間接的に剥離が抑制された結果ではないかと考えられた。本研究の結果から、Kdapは角化ケラチノサイトの剥離を促進し、角質層構築維持機構に密接に関与する分子であると考えられた。