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イネケイ酸吸収遺伝子の機能解析

水稻硅酸吸收基因的功能分析

基本信息

批准号：
06J01562
负责人：
三谷奈見季
金额：
$ 1.79万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

イネ科植物は一般的にケイ素集積植物とされているが、その集積程度は種によって大きく異なり、イネがオオムギやトウモロコシより高い集積を示す。しかし、これまでにイネやオオムギ、トウモロコシから同様なケイ酸トランスポーター遺伝子が同定されている。本研究ではケイ酸吸収における種間差の機構を明らかにするために。ケイ酸内向きケイ酸トランスポーターLsi1と外向きケイ酸トランスポーターLsi2の局在性、発現量、輸送活性などについてイネ、オオムギとトウモロコシ間で比較検討した。オオムギとトウモロコシのLsi1およびLsi2について生化学的手法を用いて細胞内局在性を調べたところ、両者のLsi1,Lsi2とも細胞膜に局在することが明らかになった。抗体染色でLsi2の組織局在性を調べた結果、イネのLsi2とは異なり、オオムギとトウモロコシのLsi2は内皮細胞だけに局在していた。またイネとオオムギとの間で根でのそれぞれの遺伝子の発現量をReal-time RT-PCRを用いて絶対定量法により比較した結果、根におけるmRNAの発現量はLsi1、Lsi2共にオオムギに比ベイネの方が数倍から10倍高かった。さらにアフリカツメガエルoocyteを用いたヘテロ発現系でそれぞれの輸送体の持つケイ酸輸送活性の比較も行った。Lsi2に関してoocyteで発現させた同時にoocyteよりmicrosomeを抽出しwestern blotで発現しているタンパク質の定量を行い、発現タンパク質レベルでの輸送活性を比較した。その結果、イネとオオムギと比較してイネの方がわずかに高かった。これらの結果はイネのケイ酸吸収能力の高さは主にケイ酸吸収関連遺伝子がオオムギやトウモロコシより高いのに加え、トランスポーターの組織局在性に起因することを示唆している。

The plants of the family Meliaceae are generally vegetarian-aggregate plants, and the degree of aggregation of the plants is shown in the following ways: The first step is to change the color of the film, and then change the color of the film. The mechanism of interspecific difference in acid absorption was studied. Comparison of the presence, occurrence, and transport activity of the inward and outward acids In addition, the biological methods used to regulate the intracellular properties of the cells are also known as Lsi1 and Lsi 2. Antibody staining results in the presence of Lsi2, Lsi2, and endothelial cells. Real-time RT-PCR was used to compare the results of quantitative analysis. The mRNA expression of Lsi1 and Lsi2 was several times higher than that of Lsi1 and Lsi2. A comparative study of the acid transport activity of the carrier was conducted. Lsi2 was detected by Western blot and detected by oocyte. The result of the experiment is that the ratio of the two factors is higher than that of the other factors. The results show that the high acid absorption capacity of the product is mainly due to the high acid absorption related factors.