SHPS-1の膵臓癌に対する癌抑制および転移抑制効果の検討

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SHPS-1の膵臓癌に対する癌抑制および転移抑制効果の検討まず、はじめにhuman pancreatic cancer cell lineにSHPS-1を強制発現させた細胞を樹立した。採取したcloneは、spindle like shapeとなり全体がflatで、比較的均一な細胞集団に形態変化した。MTT assay、Invasioll assay、Migration assay、Wound healing assayを行なったが、cell lineとSHPS-1強制発現系との間に有意な差は認められなかった。Soft agar colony formation、collagen gelcolony formationを行なったところ、colonyはSHPS-1発現系で著明に抑制された。spreading assayでは、SHPS-1発現系で著明にspreadingが回復した。以上の実験結果からは、human pancreaticcancer cell lineのSHPS-1強制発現系では、細胞運動、細胞浸潤、細胞増殖には、有意な変化は認められなかった。しかし、cololly formation assayでcolonyを著明に抑制したことから、腫瘍のanchorage indepelldent growthに関与していることが示唆された。次にSR3Y1にSHPS-1を強制発現させた細胞株にshRNAを用いてSHP-2をノックダウンした細胞株を作成した。SHP-2ノックダウン細胞では、colony formation assayが回復し、細胞形態もroundに変化した。このことから、SHPS-1の作用中で、colony formation assay、細胞形態変化に関しては、SHP-2を介したシグナルが重要であると考えられた。