ブタ回虫幼虫における糖鎖合成関連遺伝子の網羅的クローニングと機能解析

蛔虫幼虫糖链合成相关基因的综合克隆及功能分析

• 批准号: 18790296
• 负责人: 平田 晴之
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790296/
• 关键词: 寄生虫病学; 糖鎖; 分子生物学; 幼虫移行症; データベース

1.(前年度の続き)ブタ回虫幼虫の糖鎖合成関連遺伝子の網羅的クローニング糖鎖合成関連遺伝子群のクローニングと塩基配列の解読前年度に引き続いて得られたブタ回虫幼虫糖鎖合成関連候補遺伝子のクローニングによって合計12クローン得て、これら遺伝子の塩基配列をすべて決定した。2.ブタ回虫幼虫の糖鎖合成関連遺伝子の生物学的機能解析糖鎖合成関連遺伝子のクローニングと塩基配列の解読を継続し、同時にクローニング、及び全塩基配列を決定した遺伝子の12クローンの遺伝子のうち5クローンを生物学的機能の解析を以下のように行った。(1)ブタ回虫幼虫糖鎖合成関連遺伝子の組換えタンパク質の作製得られた5クローンの糖鎖合成関連遺伝子を糖鎖修飾が認められる昆虫細胞を用いて発現・精製し、得られた組換え発現タンパク質をBALB/cマウスに免疫することにより抗血清を得た。(2)ブタ回虫幼虫糖鎖合成関連遺伝子の組換え発現産物の性状解析ブタ回虫幼虫糖鎖合成関連遺伝子発現産物の分子量、抗原性及び生物活性が天然型そのものと一致するか、ブタ回虫幼虫虫体の抽出液と免疫マウス血清を用いてイムノブロット法により確認を行い、ブタ回虫幼虫遺伝子であることを確認した。本研究ではブタ回虫幼虫糖鎖合成関連遺伝子のクローニングに成功し、これらは回虫由来の遺伝子あることを確認した。今後、残りの7クローンの生物学的機能解析を引き続き行い、得られたブタ回虫幼虫糖鎖合成関連組換えタンパク質に対する免疫マウス血清を用いて、ブタ回虫幼虫虫体での局在、あるいは発育ステージ(卵→幼虫包蔵卵→幼虫→成虫)特異性の有無を確認する。

1. (Previous year's report) The total number of candidate genes for glyco-lock synthesis of larvae was 12. The number of candidate genes for glyco-lock synthesis of larvae was 12. The number of candidate genes for glyco-lock synthesis of larvae was determined. 2. Biological functional analysis of genes related to glycan synthesis in larvae of P. nigra. The analysis of biological functions of genes related to glycan synthesis in larvae of P. nigra is as follows: (1)The gene encoding the glycide-lock synthesis of the larvae of the insect was purified and purified from the insect cells. (2)The molecular weight, antigenicity and biological activity of the products of glycogen synthesis related genes of larvae of larvae In this study, we successfully identified the origin of glycophyllocene in the larvae of the insect. In the future, the biological function analysis of 7 kinds of insects will be carried out, and the use of immune serum will be confirmed, and the existence of specific breeding methods (egg → larva egg → larva → adult) will be confirmed.