RNA干渉による変異型RASの発現抑制が肺癌の増殖やシグナル伝達系に与える影響

RNA干扰抑制突变RAS表达对肺癌生长及信号转导系统的影响

• 批准号: 18790532
• 负责人: 砂長 則明
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790532/
• 关键词: 肺癌; 変異型KRAS; RNA干渉; 細胞増殖; シグナル伝達

KRAS変異陽性非小細胞肺癌にて、RNA干渉ベクターを用い、変異型KRASのみを特異的に抑制して細胞増殖や生存を抑制するか調べ、KRAS変異が非小細胞肺癌の悪性形質の維持に必要であるか検証することを目的とした。KRAS遺伝子変異に相補的なsiRNAを産生するRNA干渉ベクターを作製し、変異型KRAS陽性の4つの非小細胞肺癌細胞株にてKRAS発現が抑制される事を確認した。MTTアッセイでは全細胞にて細胞増殖の抑制を認め、寒天培地でのコロニーフォーメーションアッセイではコロニー形成能が80〜90%抑制された。以上よりKRAS変異が非小細胞肺癌の悪性形質の維持に重要な役割を果たすと考えられた。さらにRNA干渉による変異型RASの発現抑制がRAS下流シグナル伝達に与える影響を調べることを目的として、KRAS発現抑制が遺伝子発現プロファイルに与える影響をmicroarrayにより解析したところ、各々4つの非小細胞肺癌細胞株において280から330までの遺伝子の発現が有意に変化することがわかった。現在はmicroarrayにて同定された遺伝子群の情報から、パスウェイ解析や各々の遺伝子について機能解析をすすめている。その他実績として下記の報告をした。肺癌においてRAS関連遺伝子であるRASSF2の発現及びプロモーターメチル化の解析を行い、RASSF2のメチル化による発現抑制や、非喫煙者の非小細胞肺癌患者において有意にメチル化の頻度が高い事を報告した。EGFR遺伝子変異陽性非小細胞肺癌患者に対するEGFRチロシンキナーゼ阻害剤ゲフィチニブの有用性を検証する第二相試験を行い、奏功率76%、無増悪生存期間中央値12.9ケ月と高い有用性を報告し、一方でFDP-PET検査をゲフィチニブ治療開始初期に行い、SUV値の変化がゲフィチニブの治療効果の早期予測に有用である可能性を報告した。

KRAS heterogeneously positive non-small cell lung cancer, RNA stem cells, heterogeneously KRAS heterogeneously specific inhibition of cell proliferation and survival, and KRAS heterogeneously necessary for maintenance of non-small cell lung cancer characteristics. We confirmed the inhibition of KRAS expression in 4 non-small cell lung cancer cell lines with heterotypic KRAS positive by siRNA production of RNA stem cells. MTT inhibition of whole cell proliferation, inhibition of whole cell proliferation in cold culture, 80 ~ 90% inhibition of whole cell proliferation. The above KRAS differences are important for the maintenance of non-small cell lung cancer. In addition, the expression inhibition of different RAS genes in RNA stem cells and the modulation of RAS down-stream gene expression and its effects on microarray analysis were analyzed in four NSCLC cell lines from 280 to 330. Now the microarray is set up to analyze the information and functions of each group. The following is a report on his performance. RASSF2 detection and analysis of RASSF2 in lung cancer, RASSF2 detection and suppression of RASSF2 detection, and high frequency of intentional RASSF2 detection in non-smokers with NSCLC were reported. EGFR gene mutation positive non-small cell lung cancer patients in the second phase of the test, the performance power 76%, no increase in survival time of the central 12.9 months high usefulness report, one side of the FDP-PET test in the initial treatment, SUV mutation in the early prediction of the treatment value useful report

项目成果

Epigenetic inactivation of the RAS-effector gene RASSF2 in lung cancers.

• DOI: 10.3892/ijo.31.1.169
• 发表时间: 2007-07
• 期刊: International journal of oncology
• 影响因子: 5.2
• 作者: K. Kaira;N. Sunaga;Y. Tomizawa;N. Yanagitani;T. Ishizuka;R. Saito;T. Nakajima;M. Mori

Usefulness of FDG-PET for early prediction of the response to gefitinib in non-small cell lung cancer

• DOI: 10.1016/j.lungcan.2007.08.012
• 发表时间: 2008-02-01
• 期刊: LUNG CANCER
• 影响因子: 5.3
• 作者: Sunaga, Noriaki;Oriuchi, Noboru;Mori, Masatomo
• 通讯作者: Mori, Masatomo

Phase II prospective study of the efficacy of gefitinib for the treatment of stage III/IV non-small cell lung cancer with EGFR mutations, irrespective of previous chemotherapy

• DOI: 10.1016/j.lungcan.2007.01.025
• 发表时间: 2007-06-01
• 期刊: LUNG CANCER
• 影响因子: 5.3
• 作者: Sunaga, Noriaki;Tomizawa, Yoshio;Mori, Masatomo
• 通讯作者: Mori, Masatomo