透析アミロイドーシスの分子発症機序の解明

阐明透析淀粉样变性的分子机制

• 批准号: 18790565
• 负责人: 森本 尚孝
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790565/
• 关键词: 透析アミロイド症; 透析; yeast two-hybrid system; 骨関節障害; 透析アミロイドーシス; 発症機序; beta2-microglobulin

(1)透析アミロイドーシス(DRA)は、長期透析患者においてβ_2-microglobulin(β_2-m)を前駆蛋白とするアミロイドが主として滑膜、腱、靱帯、軟骨、椎間板、骨に沈着し、骨関節障害を生じ、進行すると全身の諸臓器に沈着し消化器障害、心機能障害などをきたす疾患である。近年透析治療の改善に伴い、長期透析患者が増加している。その結果DRAが透析患者のQOL、ADLを損なわせる大きな原因となっている。本症はβ_2-mアミロイドの沈着、マクロファージを中心とした炎症反応とその糖化蛋白(AGE化)などの修飾反応による組織障害によって成り立っている。しかしながら、アミロイド線維の形成メカニズムはまだ解明されていない。この極初期のアミロイド線維が沈着する部位における微小環境と蛋白の相互作用を解明することが重要であると考えた。様々な蛋自の相互作用を解明するための手法として酵母を使ったyeast two-hybrid systemを用いて実験を行った。Intactなβ_2-mに相互作用する蛋白をヒトcDNAライブラリーからスクリーニングしたところprocollagen c-proteinase enhancer protein(PCPE)が同定された。これら蛋白質の相互作用に関しては、免疫沈降法、pull-down assay、solid phase binding assayなどによって確認した。さらにアミロイドの線維形成にもPCPEが影響を与えているかどうかについても検討を行なったが、線維の伸長反応には影響を与えなかった。PCPEはDRA発症の極初期におけるアミロイド沈着に関与する蛋白の可能性があると考えられた。

(1)Dialysis disorders (DRA) include β_2-microglobulin(β_2-m) protein expression in synovium, tendon, cartilage, intervertebral plate, bone deposition, osteoarticular disorders, systemic organ deposition, digestive disorders, and cardiac dysfunction in chronic dialysis patients. In recent years, the improvement of dialysis treatment is accompanied by an increase in the number of medium and long-term dialysis patients. Results: QOL and ADL of patients on dialysis were impaired due to various causes. This disease is characterized by β_2-m protein deposition, protein metabolism, and protein metabolism. The shape of the line dimension is different from that of the line dimension. The early stages of the disease are characterized by the presence of micro-environment and protein interactions. The interaction between yeast and egg is explained in detail. Intact β_2-m interaction, protein expression, cDNA translation, and procollagen c-protease enhancer protein(PCPE) were identified. Protein interactions are identified by immunoprecipitation, pull-down assay and solid phase binding assay. In addition, the influence of PCPE on the formation of linear dimension and the influence on the elongation of linear dimension are discussed. PCPE is a very early stage of DRA development.

项目成果

β_2microglobulin (β_2-m)相互作用蛋白の検索と滑膜局所沈着の分子機構

寻找β_2微球蛋白（β_2-m）相互作用蛋白及局部滑膜沉积的分子机制

• 发表时间: 2007
• 作者: Tomohiko Okuda;et. al.;Tatsumi S;宮本賢一;伊藤美紀子;Tatsumi S;Miyamoto K;Hiramatsu K;宮本賢一;宮本賢一;Tatsumi S;Hiramatsu K;Kuwahata M;Ito M;森本尚孝
• 通讯作者: 森本尚孝