透析アミロイドーシスの分子発症機序の解明

(1)透析アミロイドーシス(DRA)は、長期透析患者においてβ_2-microglobulin(β_2-m)を前駆蛋白とするアミロイドが主として滑膜、腱、靱帯、軟骨、椎間板、骨に沈着し、骨関節障害を生じ、進行すると全身の諸臓器に沈着し消化器障害、心機能障害などをきたす疾患である。近年透析治療の改善に伴い、長期透析患者が増加している。その結果DRAが透析患者のQOL、ADLを損なわせる大きな原因となっている。本症はβ_2-mアミロイドの沈着、マクロファージを中心とした炎症反応とその糖化蛋白(AGE化)などの修飾反応による組織障害によって成り立っている。しかしながら、アミロイド線維の形成メカニズムはまだ解明されていない。この極初期のアミロイド線維が沈着する部位における微小環境と蛋白の相互作用を解明することが重要であると考えた。様々な蛋自の相互作用を解明するための手法として酵母を使ったyeast two-hybrid systemを用いて実験を行った。Intactなβ_2-mに相互作用する蛋白をヒトcDNAライブラリーからスクリーニングしたところprocollagen c-proteinase enhancer protein(PCPE)が同定された。これら蛋白質の相互作用に関しては、免疫沈降法、pull-down assay、solid phase binding assayなどによって確認した。さらにアミロイドの線維形成にもPCPEが影響を与えているかどうかについても検討を行なったが、線維の伸長反応には影響を与えなかった。PCPEはDRA発症の極初期におけるアミロイド沈着に関与する蛋白の可能性があると考えられた。

(1)透析アミロイドーシス(DRA)は、長期透析患者においてβ_2-microglobulin(β_2-m)を前駆蛋白とするアミロイドが主として滑膜、腱、靱帯、軟骨、椎間板、骨に沈着し、骨関節障害を生じ、進行すると全身の諸臓器に沈着し消化器障害、心機能障害などをきたす疾患である。近年透析治療の改善に伴い、長期透析患者が増加している。その結果DRAが透析患者のQOL、ADLを損なわせる大きな原因となっている。本症はβ_2-mアミロイドの沈着、マクロファージを中心とした炎症反応とその糖化蛋白(AGE化)などの修飾反応による組織障害によって成り立っている。しかしながら、アミロイド線維の形成メカニズムはまだ解明されていない。この極初期のアミロイド線維が沈着する部位における微小環境と蛋白の相互作用を解明することが重要であると考えた。様々な蛋自の相互作用を解明するための手法として酵母を使ったyeast two-hybrid systemを用いて実験を行った。Intactなβ_2-mに相互作用する蛋白をヒトcDNAライブラリーからスクリーニングしたところprocollagen c-proteinase enhancer protein(PCPE)が同定された。これら蛋白質の相互作用に関しては、免疫沈降法、pull-down assay、solid phase binding assayなどによって確認した。さらにアミロイドの線維形成にもPCPEが影響を与えているかどうかについても検討を行なったが、線維の伸長反応には影響を与えなかった。PCPEはDRA発症の極初期におけるアミロイド沈着に関与する蛋白の可能性があると考えられた。