骨髄細胞のTREM2陽性マイクログリア細胞への分化誘導

诱导骨髓细胞分化为 TREM2 阳性小胶质细胞

• 批准号: 18790590
• 负责人: 高橋 和也
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790590/
• 关键词: マイクログリア; TREM2; 再生医療; ホメオスターシス; 骨髄; マクロファージ

本年は、蛍光物質であるGFPを各細胞に発現するマウスから骨髄細胞を採取し、各血液系統に分化した細胞を除去したLN細胞を分離した。分離したLN細胞を、昨年培養を確立した一次グリア混合培養と共培養した。通常一次グリア混合培養内のマイクログリアは球形でTREM2陽性、Iba1陽性であるが、共培養したLN細胞は形態学的に球形のものと突起を伸ばしやや大型のアメーバー様形態を示すものが混在していた。球形の細胞はTREM2陽性、Iba1陽性でありミクログリアに分化していると考えられたが、アメーバー様の細胞はTREM2陰性であった。次にグリア培養上清のサイトカインの役割を調べるためにした一次グリア混合培養と共培養した。通常一次グリア混合培養内のマイクログリアは球形でTREM2陽性、Iba1陽性であるが、共培養培養上清でLN細胞を培養した。LN細胞は共培養したときと同様の形態を示し、円形のものと突起を出しているものの両形態を示した。しかしTREM2,Iba1は両方とも陽性であった。さらに培養上清中のGM-CSF,M-CSFの役割を検討するためLN細胞をGM-CSF,M-CSFそれぞれの存在下で培養した。GM-CSFで培養したとき、LN細胞は形態学的に膨化した。TREM2は細胞内で陽性であり、Iba1は陽性であった。LN細胞をM-CSFで培養したとき、培養上清で培養したときと同様にLN細胞は円形のものと突起を出しているものの両形態を示し、TREM2,Iba1両方とも陽性であった。以上のことから一次グリア混合培養上清にはM-CSFが含まれていると考えられ、ミクログリアの分化環境下ではM-CSFが重要であると思われた。しかし他のグリアとの細胞接着がミクログリアの形態を維持するために必要であると考えられた。現在これらの結果をまとめ論文準備中である。

In this year, GFP was detected in each cell, and the cells were isolated from each blood system. Isolation of LN cells, establishment of a mixed culture and co-culture In general, when the cells are cultured in a mixed culture, they are spherical, TREM2 positive, Iba1 positive, and co-cultured. When the cells are cultured in a mixed culture, the morphology of the cells is spherical, and the morphology of the cells is large. Spherical cells are TREM2 positive, Iba1 positive and TREM2 negative. The secondary culture supernatant was mixed with the secondary culture medium. In general, in a mixed culture, Trem2-positive and Iba1-positive cells are cultured. LN cells were co-cultured and showed the same morphology, shape and protrusion. $> TREM2,Iba1 LN cells were cultured in the presence of GM-CSF and M-CSF in culture supernatant. GM-CSF culture and LN cell morphology were studied. TREM2 intracellular, Iba1 LN cells can be cultured in M-CSF, and the culture supernatant can be cultured in M-CSF. Similarly, the shape of LN cells with rounded hands and protrusions can be seen. TREM2 and Iba1 are positive. M-CSF in supernatant of mixed culture is important in differentiation environment. The cells of the cell are then divided into three groups, and the cells of the cell are then divided into three groups. Now the paper is ready.

项目成果

Tissue debris clearance by TREM2-transduced myeloid precursors in experimental autoimmune encephalomyelitis

TREM2 转导的骨髓前体细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎中清除组织碎片

• 发表时间: 2007
• 作者: Nakata M;Kuwabara S;Kanai K;Misawa S;Tamura N;Sawai S;Hattori T;Bostock H;金井 数明;金井 数明;Takahashi Kazuya;Harald Neumann;Takahashi Kazuya
• 通讯作者: Takahashi Kazuya