甲状腺未分化癌に対する癌特異的免疫遺伝子治療

点击翻译按钮获取中文摘要

本研究の目的は,主要特異的プロモーター制御下にインターロイキン12(IL-12)もしくは腫瘍壊死因子関連アポトーシス誘導リガンド(TRAIL)を発現する組換え非増殖型アデノウイルスベクターを腫瘍内投与することで甲状腺未分化癌に対する新たな治療を開発することである。作製済みのhTERTプロモーター制御下IL-12発現組換えアデノウイルスベクターAdhTERTIL-12,hTERTプロモーター制御下ルシフェラーゼ発現アデノウイルスベクターAdhTERTluc,CWプロモーター制御下マウスIL-12発現ベクターAdCMVIL-12については,浮遊293細胞で増幅後,CsCl密度勾配法にて随時精製を行った。その力価は従来のプラークアッセイ法にて決定した。hTERTプロモーター制御下もしくはCMVプロモーター制御下マウスTRAIL発現ベクターについては293細胞内でのウイルス発生過程に問題があり,実験条件を変えて継続中である。8505C細胞を移植して担癌ヌードマウスを作製しているが,常に90%以上のヌードマウスで癌細胞生着と腫瘍形成を確認できた。in vivoにおける抗腫瘍効果,延命効果および腫瘍再形成阻止効果の検証のため,坦癌マウスの腫瘍内にmock,AdhTERTLuc,AdCWIL-12,AdhTERTIL-12をそれぞれ1x10^9 pfuで投与し,30日間にわたり腫瘍のサイズとマウスの生存数を確認した。観察期間内で担癌マウスの死亡はほとんど確認されなかった。mock群,AdhTERTLuc群では経時的に腫瘍は増大した。AdhTERTIL-12群はAdCMvIL-12群程の腫瘍増大抑制効果は得られず,ウイルス投与後2週間より腫瘍の増殖が顕著となり,AdhTERTluc群と同程度の腫瘍サイズとなった。