小児白血病融合転写因子E2A-HLFの高カルシウム血症を誘導する下流遺伝子の同定

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17;19転座(t(17;19^+)急性リンパ性白血病(ALL)は、高カルシウム血症を高率に合併する。高カルシウム血症の原因蛋白Parathyroid hormone-related protein (PTHrP)をE2A-HLF融合転写因子の下流遺伝子の候補として解析を実施した。(1)PTHrPの発現をreal time PCR法を用いて解析した。t(17;i9)^+白血病細胞株では17;19転座のない(t(17;19)^-)白血病細胞株に比して発現量の増加を認めた。ウエスタンブロツト法を用いて蛋白発現を試みたが、現在のところ良い抗体が存在しないため解析ができなかった。(2)t(17;19)^-ALL細胞株、697とNalm6細胞株にE2A-HLFを誘導した細胞株(697/E2A-HLFとNairn 6/E2A-HLF)を用いて発現解析をreal time PCR法を用いて実施した。PTHrPの発現量が本来少ないこれらの細胞株は発現量が増え、Nalm 6/E2A-HLFではt(17;19)^+ALL株レベルに697/E2A-HLFではt(17;19)^+ALL株レベルに比して著明な増加を認めた。(2)697株と697/E2A-HLF株の培養液中のPTHrPをELISA法を用いて計測した。E2A-HLF誘導により培養液中のPTHrPは増加した。(3)E2Aの転写活性化領域の変異を有するE2A-HLFとHLFとDNA結合鎖域の変異を有するE2A-HLF変異体を697細胞に導入した。いずれの変異体でもPTHrPの発現量増加は抑制された。以上の結果はPTHrPがE2A-HLFの下流遺伝子であることを示唆し、t(17;19)^+ALLにおいてE2A-HLF融合転写因子の発現が白血病化をおこし、随伴症状の高カルシュウム血症を誘導している。