腫傷随伴マクロファージによる血管新生機構を標的とした乳癌治療の開発と臨床応用

点击翻译按钮获取中文摘要

血管新生は癌細胞が増殖・浸潤・転移する上で必須の分子機構である。腫瘍随伴マクロファージ(TAM)が腫瘍の増殖を支持する分子機構には不明な点が多い。本研究では、血管新生機構における単球・マクロファージ系細胞の役割を明らかにする目的で、マクロファージ系および顆粒球系に分化させた血管内皮増殖因子(VEGF)とその受容体の発現を解析した。ヒト白血病細胞株(HL-60)細胞を用いてVEGFの発現をRT-PCRを用いて解析したところ、PMAによるマクロファージ分化でVEGF-CのmRNA発現が増加したが、DMSOによる顆粒球分化ではVEGF-CのmRNA発現に変化は見られなかった。VEGF-Cの発現増加は蛋白レベルでも確認でき、細胞をTNF-αやLPSで刺激したところ、細胞内のVEGF-C蛋白質の発現が増強し、培養上清中にもVEGF-Cを放出する事がわかった。VEGF受容体のmRNAの発現をRT-PCRを用いて解析したところ、マクロファージ分化により、VEGFR-1,VEGFR-2,Neuropilin-1の発現が増加したが、顆粒球分化によって発現が増加したのはVEGFR-1のみであった。マクロファージ分化において増加したVEGF受容体へのVEGF結合能をフローサイトメトリーで解析した。マクロファージ分化により、VEGF結合能は明らかに増加し、mRNAの発現の増強と合致する所見であった。以上の事から、HL-60細胞におけるVEGFとVEGF受容体の発現は、マクロファージ分化により特異的に制御されている事が明らかとなった。また、TAMはVEGF-Cの細胞外への放出を介して血管新生に関与し、腫瘍の増殖を支持している事が示唆された。単球・マクロファージ系細胞による血管新生のパラクリンコントロールを阻害する事は、乳癌治療において重要な標的と考えられる。