ヒト角膜輪部、結膜組織からの体性幹細胞の探索と評価

人类角膜缘和结膜组织成体干细胞的搜索和评价

• 批准号: 18791262
• 负责人: 横尾 誠一
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791262/
• 关键词: 幹細胞; 角膜; 結膜; 無血清培養; 組織幹細胞; 再生医療; 幹細胞の分離

本年度の研究は幹細胞候補コロニーの増殖能や基底細胞層の発現蛋白質の検討、単一細胞由来角膜・結膜上皮様シートの作成、角膜・結膜上皮特異的ケラチンパターンの発現検討をすることにより、幹細胞候補コロニーの同定と幹細胞採取法の確立を目指して実施した。その結果、幹細胞様コロニーは活発な増殖能をもち、基底膜マーカーであるP63に陽性であり、単一細胞由来の角膜・結膜シートにまで組織を形成することを確認した。これらは採取組織由来の角膜、結膜上皮への分化能をもっており、異なる増殖因子による刺激で杯細胞へも分化誘導が可能であり多分化能の発揮を確認した。ただし幹細胞の特徴である再複製能は弱く、現時点では前駆細胞であることを証明するに留まった。培養条件の検索の結果、成分既知な完全無血清培養で移植に耐えうる角膜上皮シート、結膜上皮シートの作成に成功したが、その際に重要な因子は既に明らかになっている増殖因子の作用に加え、脂溶性栄養素の添加が必須なことが判明した。そのため本研究成果によって、遂に感染症の心配の無い再生医療の実施のみならず、幹細胞と癌、ウィルス、幹細胞・癌細胞マーカーの探索と医学への応用などかなり広範囲に医学の発展に寄与し我が国のライフサイエンス事業を国際的な先導役に導く可能性を持つ幹細胞を用いた研究の実施が可能となった。また幹細胞を採取するには幹細胞採取用培養器具の開発が必須なことが判明し、本発明による商品化に成功した。既に国内・海外の理化学機器メーカーによる新製品の開発競争が始まっており、本研究成果の結果、学術的な知見に留まらず、世界的な培養器具の変革をもたらす重要な成果が得られた。本研究成果の継続的かつ発展的な研究活動の実施により今後更に重要性は高まっていくと考えられ、極めて大きな成果が得られたものと考えられる。

This year's research focused on the development of stem cell candidates, the development of proteins in the basal layer of the epidermis, the creation of corneal and conjunctival epithelial-derived cells, the development of corneal and conjunctival epithelial-specific cells, the identification of stem cell candidates, and the establishment of stem cell collection methods. Results: Stem cell viability, basement membrane viability, P63 positivity, cornea, conjunctiva, tissue formation of single cell origin, and cell viability were confirmed. The differentiation ability of corneal and conjunctival epithelium derived from tissue was confirmed by stimulating the differentiation ability of goblet cells with different growth factors. The characteristics of stem cells are shown in the following table. The results and components of culture conditions are known. The successful preparation of corneal epithelium and conjunctival epithelium in serum-free culture is important. The role of proliferation factors in growth is enhanced. The addition of lipid-soluble nutrients is necessary. The results of this research have led to the exploration of the application of stem cells and cancer in the treatment of infectious diseases, stem cells and cancer, and the possibility of conducting research on the application of stem cells. The development of a culture instrument for stem cell collection is necessary for the identification and commercialization of stem cells. The competition for the development of new products in domestic and overseas chemical machinery has begun, and the results of this research, academic knowledge and innovation of culture equipment in the world have been obtained. The research results of this research are of great importance in the future.

项目成果

Human corneal epithelial equivalents for ocular surface reconstruction in complete serum free culture system without unknown factors

在无未知因素的完全无血清培养系统中用于眼表重建的人角膜上皮等效物

• 发表时间: 2008
• 期刊: Invest Ophthalmol Vis Sci 49
• 作者: Yokoo S;Yamagami S;Usui T;Amano S;Araie M
• 通讯作者: Araie M

Inhibition of corneal neovascularization by blocking the angiotensin II type 1 receptor.

• DOI: 10.1167/iovs.07-0964
• 发表时间: 2008-10
• 期刊: Investigative ophthalmology & visual science
• 影响因子: 4.4
• 作者: T. Usui;Kenji Sugisaki;A. Iriyama;Seiichi Yokoo;S. Yamagami;N. Nagai;S. Ishida;S. Amano

細胞工学 vol.26 No5 2007

细胞工程第26卷第5期2007年

• 发表时间: 2007
• 作者: 横尾誠一;山上聡
• 通讯作者: 山上聡

Transplantation of a sheet of human corneal endothelial cell in a rabbit model

• 发表时间: 2008-01
• 期刊: Molecular Vision
• 影响因子: 2.2
• 作者: Kouichiro Hitani;Seiichi Yokoo;N. Honda;T. Usui;S. Yamagami;S. Amano

染色体異常に伴う角膜輪部機能不全の一例

与染色体异常相关的角膜缘功能障碍的例子

• 发表时间: 2007
• 作者: 中川卓、臼井智彦、池田和敏、横尾誠一;他2名
• 通讯作者: 他2名