歯周病原性細菌における薬剤耐性機構の解明

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慢性歯周炎の主たる原因細菌であるPorphyromonas gingivalisは,ゲノムDNA塩基配列が解読されている.本ゲノム上には抗菌薬の多剤耐性に関与する多剤(異物)排出遺伝子ホモログが多数存在する.そこでこれら相同性の高いホモログ破壊株を作製し,薬剤耐性遺伝子について検討した.本菌W83株のゲノムDNA上に存在するmultidrug and toxic compound extrusion(MATE)型トランスポーターホモログ4個,ATP-binding cassette(ABC)型トランスポーターのホモログ4個,合計8個の組換え変異株をそれぞれ作製した.サザンハイブリダイゼーションやPCRで,予想した組換え変異株であることを確認し,またmRNA発現においては,Reverse Transcription PCRにて確かめた.合計8個の遺伝子ホモログ破壊株において抗菌薬(アンピシリン,バンコマイシン,テトラサイクリン,クロラムフェニコール,ノルフロキサシン,フシジン酸,ノボビオシン,メトロニダゾール,ピューロマイシンなど)界面活性剤(ラウリル硫酸ナトリウム)色素(アクリフラビン,エチジウムブロマイド)など抗菌活性を示す薬剤の最小発育阻止濃度(MIC)を親株と比較したが,著名な変化(遺伝子ホモログ破壊におけるMC値の減少)は認められなかった.その結果,本菌には未だ同定・解析されていない薬剤(異物)排出遺伝子の存在が考えられた.