歯周病原性細菌における薬剤耐性機構の解明

阐明牙周病原菌的耐药机制

• 批准号: 18791358
• 负责人: 上田 青海
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Matsumoto Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791358/
• 关键词: 歯周病原細菌; Porphyromonas gingivalis; 抗菌薬; 薬剤耐性; 多剤排出遺伝子; トランスポーター; エリスロマイシン

慢性歯周炎の主たる原因細菌であるPorphyromonas gingivalisは,ゲノムDNA塩基配列が解読されている.本ゲノム上には抗菌薬の多剤耐性に関与する多剤(異物)排出遺伝子ホモログが多数存在する.そこでこれら相同性の高いホモログ破壊株を作製し,薬剤耐性遺伝子について検討した.本菌W83株のゲノムDNA上に存在するmultidrug and toxic compound extrusion(MATE)型トランスポーターホモログ4個,ATP-binding cassette(ABC)型トランスポーターのホモログ4個,合計8個の組換え変異株をそれぞれ作製した.サザンハイブリダイゼーションやPCRで,予想した組換え変異株であることを確認し,またmRNA発現においては,Reverse Transcription PCRにて確かめた.合計8個の遺伝子ホモログ破壊株において抗菌薬(アンピシリン,バンコマイシン,テトラサイクリン,クロラムフェニコール,ノルフロキサシン,フシジン酸,ノボビオシン,メトロニダゾール,ピューロマイシンなど)界面活性剤(ラウリル硫酸ナトリウム)色素(アクリフラビン,エチジウムブロマイド)など抗菌活性を示す薬剤の最小発育阻止濃度(MIC)を親株と比較したが,著名な変化(遺伝子ホモログ破壊におけるMC値の減少)は認められなかった.その結果,本菌には未だ同定・解析されていない薬剤(異物)排出遺伝子の存在が考えられた.

Chronic 歯 periodontitis is the main たる cause of bacteria であるPorphyromonas gingivalis ゲノム,ゲノムDNA base coordination が decomposition 読されて る る. On this ゲ ノ ム に は antibacterial 薬 の tonic more patience に masato and す る tonic (foreign) more eduction heritage 伝 son ホ モ ロ グ が most existing す る. そ こ で こ れ ら identity の high い ホ モ ロ グ し, the broken 壊 strains を cropping 薬 tonic patience heritage 伝 son に つ い て beg し 検 た. In the <s:1> ゲノムDNA of strain W83 of this bacterium, there are に するmultidrug and toxic compound extrusion(MATE) type トラ <s:1> スポ スポ タ タ ホモログ ホモログ, four ATP-binding Cassette (ABC) ト ラ ン ス ポ ー タ ー の ホ モ ロ グ 4, total eight の group in え - different strains を そ れ ぞ れ cropping し た. サ ザ ン ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン や PCR で, to want to し た group in え - different strains で あ る こ と を confirm し, ま た mRNA 発 now に お い て は, Reverse Transcription PCRにて confirm めた. Total 8 の heritage 伝 son ホ モ ロ グ broken 壊 strains に お い て antibacterial 薬 (ア ン ピ シ リ ン, バ ン コ マ イ シ ン, テ ト ラ サ イ ク リ ン, ク ロ ラ ム フ ェ ニ コ ー ル, ノ ル フ ロ キ サ シ ン, フ シ ジ ン acid, ノ ボ ビ オ シ ン, メ ト ロ ニ ダ ゾ ー ル, ピ ュ ー ロ マ イ シ ン な ど) interface active tonic (ラ ウ リ ル sulfate ナ ト リ ウ ム) pigment (ア ク リ フ ラ ビ ン, エ チ ジ ウ ム ブ ロ マ イ ド) な ど antibacterial activity を shown す 薬 tonic の minimum 発) prevent concentration (MIC) を parent strain と compare し た が, famous な variations change (legacy 伝 son ホ モ ロ グ broken 壊 に お け る MC numerical の decrease) は recognize め ら れ な か っ た. そ の as a result, the bacteria に は not だ with fixed, parsing さ れ て い な い 薬 tonic (foreign) The offspring of the exudate 伝 exist in が examination えられた.