ホスファチジルエタノールアミン生合成系酵素の構造機能解析

磷脂酰乙醇胺生物合成酶的结构和功能分析

• 批准号: 07J02035
• 负责人: 大塚 淳
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J02035/
• 关键词: ホスファチジルエタノールアミン; CDP-Etn経路; ECT; EKI; EPT; 膜タンパク質; 相互作用解析

ホスファチジルエタノールアミン生合成系に属するEKI、ECT、EPTの3つの酵素について、酵素間の相互作用解析をおこなうことを目指して研究を進めた。【酵素EKIと酵素ECTの相互作用解析】酵素EKIは平成19年度に確立した大腸菌を宿主とする発現系を用いて大量に発現させ、高純度の精製タンパク質を調製することに成功しか。本研究課題以前に確立した発現・精製系を用いてECTの精製サンプルを調製し、EKIとの相互作用解析を行った。その結果、EKIとECTの間には分子間相互作用が存在しないことが強く示唆された。【酵素EPTと酵素ECTの相互作用解析】メタノール資化酵母Pichia pastorisを宿主とする膜タンパク質EPTの発現系構築を目指したが目的の発現系を得ることができなかった。そこで、大腸菌を宿主とするEPTの発現系を用いて精製EPTの調製を試みた。EPTのN末端側に付加したアフィニティー精製タグを利用した精製によりEPTの純度を上げることができたが、EPTは非常に不安定であることが分かった。精製EPTを用いてECTとの相互作用解析を行ったが、EPTとECTの間には分子間相互作用が存在しないことが強く示唆された。

The system of synthesis of EKI, ECT, EPT 3 enzymes and the analysis of the interaction between enzymes is very important in the study of enzyme synthesis. [analysis of the interaction of enzyme EKI

项目成果

ホスファチジルエタノールアミン生合成系酵素ECTが持つ2つのドメインの役割分担

磷脂酰乙醇胺生物合成酶 ECT 两个结构域的角色共享

• 发表时间: 2008
• 作者: 中山和則;斎藤俊;諏訪雄大;横山順一;川崎 雅裕,中山 和則,瀬波 大土;川崎 雅裕,中山 和則;市川 和秀,川崎 雅裕,中山 和則,瀬波 大土,高橋 史宜;長井 稔,中山 和則;中山和則;中山和則;中山和則;中山和則;中山和則;大塚淳;大塚淳;中山和則;大塚淳
• 通讯作者: 大塚淳

ホスファチジルエタノールアミン生合成系の鍵酵素ECTの構造機能解析〜ordered bi bi反応の可視化と類似ドメインの役割分担〜

磷脂酰乙醇胺生物合成系统中关键酶ECT的结构和功能分析 - 有序bi bi反应的可视化和相似域的角色共享 -

• 发表时间: 2009
• 作者: 中山和則;斎藤俊;諏訪雄大;横山順一;川崎 雅裕,中山 和則,瀬波 大土;川崎 雅裕,中山 和則;市川 和秀,川崎 雅裕,中山 和則,瀬波 大土,高橋 史宜;長井 稔,中山 和則;中山和則;中山和則;中山和則;中山和則;中山和則;大塚淳
• 通讯作者: 大塚淳

ホスファチジルエタノールアミン生合成系酵素ECTの触媒メカニズムの構造解析

磷脂酰乙醇胺生物合成酶ECT催化机制的结构分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 中山和則;斎藤俊;諏訪雄大;横山順一;川崎 雅裕,中山 和則,瀬波 大土;川崎 雅裕,中山 和則;市川 和秀,川崎 雅裕,中山 和則,瀬波 大土,高橋 史宜;長井 稔,中山 和則;中山和則;中山和則;中山和則;中山和則;中山和則;大塚淳;大塚淳
• 通讯作者: 大塚淳