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脊椎動物の季節性測時機構の解明

阐明脊椎动物的季节计时机制

基本信息

批准号：
07J08345
负责人：
中尾暢宏
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

光周性の制御機構には、下垂体隆起葉で時刻依存的に光誘導を受け発現するTSHBがマスターコントロール遺伝子として働いている(Nakao et al.Nature,2008,452,317-322)。しかし、TSHBと同時期に発現するEYES ABSENT 3(EYA3)の光周性における役割、およびTSHB,EYA3の時刻依存的な光誘導発現調節機構は不明であり、これらを解明することは光周性の全貌の解明に繋がると考えられる。そこで、本年度の研究実施計画に示したように計画1.EYA3のターゲット遺伝子の同定、計画2.光周時計と臨界日長の関係を解明することを目標とした。計画1では、EYA3が転写共役因子であることから、免疫染色法により下垂体隆起葉におけるEYA3の時刻依存的な細胞内局在を明らかにし、EYA3が転写制御に関わる時間帯を決定した。この時間帯におけるウズラ下垂体隆起葉とウズラEYA3抗体を用いたChIP-sequenceにより104遺伝子の候補遺伝子を抽出することができた。今後、これらの遺伝子とEYA3の相互作用を解析する必要かおる。計画2では、光周時計候補遺伝子は、約77遺伝子が存在する。これらの発現部位を検討した結果、下垂体隆起葉では14遺伝子と概日時計の構成因子である時計遺伝子が発現していた。次にウズラTSHBおよびEYA3遺伝子の転写調節領域を含む約40kbpの核酸配列を決定し、転写因子結合領域を検索した。ルシフェラーゼアッセイによりシスエレメントの機能性を検討したところ、両遺伝子ともに転写活性を示したが、そのシグナル伝達経路は異なる可能性を示唆する結果が得られた。

Photocyclic control mechanisms and pendulous lobes are time-dependent photoinduced responses to TSHB (Nakao et al. Nature, 2008, 452, 317 -322). EYES ABSENT 3(EYA3) is a photoperiodic system with time-dependent photoinduction mechanisms. This year's research implementation plan shows that 1. EYA3 has the same definition and plan 2. The relationship between the critical day length of the optical cycle is explained. EYA3 is a time-dependent intracellular structure determined by immunostaining. The time frame for this event is the ChIP-sequence of the EYA3 antibody. In the future, it is necessary to analyze the interaction between EYA3 and EYA3. Project 2: About 77 candidates exist in the light cycle time meter. The results of this study show that the occurrence of this disease is related to the occurrence of 14 genes in the pituitary gland. In addition, the regulatory domain of TSHB and EYA3 genes contains about 40kbp of nucleic acid sequence determination, and the binding domain of TSHB and EYA 3 genes is realized. The functionality of the system is discussed, and the activity of the system is shown. The result is that the system is different.