PSK受容体をモデルとしたLRR型受容体におけるリガンド-受容体相互作用の解析

以 PSK 受体为模型的 LRR 型受体中配体-受体相互作用的分析

• 批准号: 07J09840
• 负责人: 篠原 秀文
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07J09840/
• 关键词: リガンド-受容体相互作用; 分泌型ペプチド; CLEペプチド; 受容体キナーゼ; LRR-RLK; リガンドフィッシング

1.植物LRR型受容体のうちLRR XIファミリーに属するすべての受容体キナーゼ28種類について細胞外領域をタグ融合タンパク質として発現させ,LRR型受容体のライブラリー化を行った.この受容体ライブラリーの応用例として,共同研究によりLRR XIに含まれる受容体であるTDRと仮道管分化阻害因子である分泌型ペプチドTDIF(CLE41/44)との直接的結合を,光親和性CLE41/44を用いたフォトアフィニティーラベル実験により証明し,LRR型受容体における新たなリガンドー受容体ペアの同定に貢献した.2.受容体ライブラリーを作製したLRR XI中のCLV1のホモログであるBAM1,BAM2およびBAM3のリガンド探索を行った.CLV1のリガンドであるCLV3ホモログであるCLEペプチド26種類を系統樹的に7つのサブファミリーに分類し,ファミリーを代表した7つのCLEペプチドについて,光親和性CLEペプチドを化学合成してフォトアフィニティーラベルを行った.その結果BAMに最も強い結合が確認されたCLE9ペプチドについて放射性標識体[^3H]CLE9を作製し,タグを介してビーズに固相固定化したBAMとの詳細な結合解析を行った結果,すべてのBAMはCLE9ペプチドを高いアフィニティーを持って結合することが示され,CLE9がBAMのリガンドであることが強く示唆された.さらに他のCLEペプチドを競合剤として用いた競合的結合解析を行ったところ,BAMは複数のCLEペプチドを結合することを見出した.LRR型受容体のライブラリーを用いることで新たなリガンドー受容体ペア2例の同定に貢献ことができ,今後もリガンド未同定のLRR XIについてリガンド探索を続けていく予定である.

1. Plant LRR type receptors are classified into 28 species, and their extracellular domains are fused. The evolution of LRR type receptors takes place. The receptor type is different from the receptor type. The receptor type is different from the receptor type. The receptor type is different from the receptor type.(CLE41/44) and its direct binding, photoaffinity CLE41/44 and its use in the LRR receptor are proved to be new and identical contributions to the LRR receptor. 2. The LRR receptor is controlled by CLV1 and BAM1. BAM2, BAM3 and BAM 3 are selected for exploration. CLV1 and CLV3 are selected for CLE 26 species in the phylogenetic tree. The results of BAM binding analysis confirmed that CLE9 was prepared and immobilized on solid phase. The results of BAM binding analysis confirmed that CLE9 was prepared and immobilized on solid phase. The results showed that CLE9 was prepared and immobilized on solid phase. In addition, the analysis of the combination of the CLE and the BAM complex is shown. The LRR receptor is used in the same way as the LRR XI receptor.

项目成果

Ligand-binding site of phytosulfokine receptor is 15-amino acid region in the island domain

植物硫因子受体的配体结合位点是岛结构域中的15个氨基酸区域

• 发表时间: 2007
• 作者: 篠原 秀文;ら;Shinohara H.
• 通讯作者: Shinohara H.

Non-cell-autonomous control of vascular stem cell fate by a CLE peptide/receptor system

• DOI: 10.1073/pnas.0808444105
• 发表时间: 2008-09-30
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Hirakawa, Yuki;Shinohara, Hidefumi;Fukuda, Hiroo
• 通讯作者: Fukuda, Hiroo

Tyroslne-sulfated glycopeptide involved in cellular proliferation and expansion in Arabidopsis

酪氨酸硫酸化糖肽参与拟南芥细胞增殖和扩增

• 发表时间: 2007
• 期刊: Proc.Natl.Acad.Sci.USA 104
• 作者: Amano Y.;et. al.
• 通讯作者: et. al.

Functional immobilization of plant receptor-like kinase onto microbeads towards receptor array construction and receptor-based ligand fishing.

• DOI: 10.1111/j.1365-313x.2007.03204.x
• 发表时间: 2007-07
• 期刊: The Plant journal : for cell and molecular biology
• 作者: Hidefumi Shinohara;Y. Matsubayashi

受容体の固相固定化を基盤とした新しいリガンド-受容体相互作用検出系

基于受体固相固定化的新型配体-受体相互作用检测系统

• 发表时间: 2008
• 作者: 篠原 秀文;ら
• 通讯作者: ら