抗癌剤応答性ペプチドフィンガープリンティングによる癌治療効果のモニタリング

通过抗癌药物反应肽指纹图谱监测癌症治疗效果

基本信息

  • 批准号:
    18700440
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.3万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1.細胞培養上清からの治療応答性ペプチドームの同定抗がん剤抵抗性がん細胞および抗癌剤感受性細胞をDocetaxel 100nM存在下および非存在下で48時間培養し,細胞培養上清をSELDI-TOFMSにより解析した。Protein chipはCM10(陽イオン交換chip),1MAC-Cu(金属親和性chipに銅を固定),IMAC-Ni(金属親和性chipにニッケルを固定)を使用した。CM10においては感受性細胞のみでDocetaxel投与後上昇および低下するpeakを,IMAC-Cuにおいては感受性細胞でのみ発現上昇するpeakを,IMAC-Niにおいては感受性細胞でのみDocetaxel投与後上昇および減少するpeakおよび抵抗性細胞でのみ発現上昇するpeakを検出し,それらのpeakを同定した。2.in vivoにおける治療応答性ペプチドームの同定in vivoにおけるがん治療のモデル系として,親株(HCT116)とHCT116-CHFRをそれぞれヌードマウスの鼠径部皮下に移植し,腫瘍径が1cmの時点からDocetaxelを投与し,治療後7日目で腹部大動脈から採血した。腫瘍は抗癌剤感受性株移植群において優位に縮小した。各群から取得した血漿はアルブミン除去後,フェニルカラムにより分画しAu chipをもちいてSELDI-TOF MS解析した。その結果,治療有効性(Docetaxel反応性)の指標となり得るpeakを再現性をもって検出し,それらのpeakを同定した。3.臨床例を用いた治療効果判定の検討。癌患者から抗癌剤投与前後の血清を経時的に採取し質量分析器(SELDI-TOF MS)でハイスループットに分析し,前年度の結果を参考に抗癌剤に反応し発現または消失するchemo-responsivefingerprintsをヒト血漿中から同定した。現在chemo-responsive fingerprintsと種々の臨床データと比較し,本研究による結果の有用性と適切性を検討中である。
1. Cell culture supernatants were cultured for 48 hours in the presence or absence of Docetaxel 100nM and analyzed by SELDI-TOFMS. Protein chip CM10 (cation exchange chip),1MAC-Cu(metal affinity chip copper immobilization),IMAC-Ni(metal affinity chip copper immobilization) are used. CM10, IMAC-Cu, IMAC-Ni, IMAC-Cu, IMAC-Ni, IMAC-Ni,IMAC-Cu,IMAC-Cu, IMAC-Ni,IMAC-Ni, IMAC-Cu,IMAC-Ni,IMAC-Ni, IMAC-Cu, IMAC-Cu, IMAC-Ni, IMAC-Ni, 2.in In vivo, the therapeutic response was identified in vivo, and the parent strain (HCT116) and HCT116-CHFR were transplanted subcutaneously into the mouse diameter. Docetaxel was administered at the time when the tumor diameter was 1 cm. Blood was collected from the abdominal artery 7 days after treatment. The number of transplant colonies of tumor resistant strains was reduced. After removing the plasma from each group, the SELDI-TOF MS analysis was performed. As a result, the index of Docetaxel-Reactivity is determined by the peak of reproducibility and the peak of reproducibility. 3. Clinical case study on evaluation of therapeutic effect. The serum samples of cancer patients before and after anti-cancer administration were analyzed by SELDI-TOF MS, and the results of the previous year were referred to as chemo-responsive fingerprints in plasma. Now, the usefulness and relevance of chemo-responsive fingerprints are discussed.

项目成果

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