細胞内蛋白質を可視化できるバイオプローブの開発

开发可可视化细胞内蛋白质的生物探针

• 批准号: 18750159
• 负责人: 阿部 洋
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18750159/
• 关键词: 蛋白質; 蛍光; アプタマー; 消光; タンパク質検出; 蛍光発生化合物; 試験管内進化法

前回まで、蛋白質と化学反応することで蛍光発生する分子プローブの開発を目指していたが、蛋白質との化学反応性が低いプローブしか得られず、その開発は難しかった。一方、我々は遺伝子検出プローブとして、最近開発した分子は1分子内での蛍光のon/offが可能であり、蛋白質検出にも応用可能であることが期待された。この分子はアジドメチル基を持ち、トリフェニルボスフィン等の還元剤によってアジド基が還元されることにより構造変化が起こり蛍光を発することが可能となる。今回、アジドメチル基を有する蛍光分子をもちいた化学反応を引金とする蛍光発光システムによるタンパク質およびペプチド検出を試みた。標的として17merからなるヒトHIV-1 Revタンパク質のarginine-rich motif(ARM)を選択した。ヒトHIV-1 Rev ARMペプチドには35merからなるRNAアプタマーが結合することがこれまでに報告されている。そこでこのRNAアプタマー配列を2分割し、ペプチド検出用プローブとすることにした。配列の異なる2種類のプローブのうち、一方にはアジドメチル基を有する蛍光分子を結合させ、もう一方のプローブには還元剤であるトリフェニルホスフィン基を導入した。この2種類のプローブを用いることで溶液中のRev ARMペプチドの検出を試みた。50mM Tris-HC1溶液中37℃で30分間反応させた結果、Rev ARMペプチド存在下の場合、非存在下の場合と比較してその蛍光強度が約25倍に増強することが示された。

The development of molecular processes for protein and chemical reactions in the past indicates that protein and chemical reactions are low in molecular processes and that development of molecular processes is difficult. A side, we have a gene expression, recently developed molecules, intramolecular light on/off, protein expression on/off, expected. The molecular structure of the compound is changed to the structure of the compound, and the molecular structure is changed to the structure of the compound. Now, there are two kinds of light molecules, one kind of light molecule and the other kind of light molecule. HIV-1 Rev 17mer is the primary arginine-rich motif(ARM). HIV-1 Rev ARM. The RNA sequence is divided into two parts, and the RNA sequence is divided into two parts. The two kinds of molecules are combined, and the other is introduced. The two types of software are available in the Rev ARM solution. The results of 30-minute reaction in 50mM Tris-HC1 solution at 37℃ show that the intensity of light in the presence and absence of Rev ARM is about 25-fold higher than that in the absence of Rev ARM.

项目成果

化学的DNA連結反応における生成物の増幅

DNA 化学连接反应中产物的扩增

• 发表时间: 2007
• 作者: H.Abe;E.T.Kool;近藤裕子;近藤裕子
• 通讯作者: 近藤裕子

alpha -C-glucoside trisphosphates based on the conformational restriction strategy.

基于构象限制策略的α-C-葡萄糖苷三磷酸。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Medicinal Chemistry 49
• 作者: M.Terauchi;H.Abe;S.C.Tovey;S.G.Dedos;C.W.Taylor;M.Paul;M.Trusselle;B.V.L.Potter;A.Matsuda;S.Shuto
• 通讯作者: S.Shuto

Rapid DNA chemical ligation for amplification of RNA and DNA signal

• DOI: 10.1021/bc700244s
• 发表时间: 2008-01-01
• 期刊: BIOCONJUGATE CHEMISTRY
• 影响因子: 4.7
• 作者: Abe, Hiroshi;Kondo, Yuko;Ito, Yoshihiro
• 通讯作者: Ito, Yoshihiro

Design and synthesis of 5'-deoxy-5'-phenyladenophostin A, a highly potent IP3 receptor ligand.

5-脱氧-5-苯基腺磷汀 A 的设计和合成，一种高效的 IP3 受体配体。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Organic Letter 8
• 作者: T.Mochizuki;Y.Kondo;H.Abe;C.W.Taylor;B.V.L.Potter;A.Matsuda;S.Shuto
• 通讯作者: S.Shuto

Chemical Aminoacylation of RNA by an intermolecular Adenosine Transfer Reaction

通过分子间腺苷转移反应对 RNA 进行化学氨酰化

• 发表时间: 2008
• 期刊: Chemistry Letters 37
• 作者: 劉明哲;他
• 通讯作者: 他