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顎顔面の形態発生に関与するL3/Lhx8遺伝子の機能解析

L3/Lhx8基因参与颌面部形态发生的功能分析

基本信息

批准号：
18890168
负责人：
井上公秀
金额：
$ 1.66万
依托单位：
Nara Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

顎顔面領域における形態発生は、その形成過程が複雑な構造からなり、非症候性に発生する口唇・口蓋裂の原因遺伝子は未だ明らかではない。LIM homeobox遺伝子であるL3/Lhx8は、顎顔面領域の形成過程に重要な関連があると考えられ、われわれのこれまでの研究により、口唇・口蓋裂発生への関与が示唆されている。そこで本研究においては、ニワトリ胚を用い顎顔面領域にエレクトロポレーションの手法にてL3/Lhx8遺伝子の導入実験およびsiRNAによる阻害実験を行った。1.ニワトリ胚へのpMiwIIIベクターを用いたL3/Lhx8遺伝子導入実験動物は、発生が継続できるよう処理したHH.Stage10〜15のニワトリ胚を用いた。L3/Lhx8遺伝子組み込みpMiwIIIベクターは、エレクトロポレーションの手法を用い、遺伝子導入を行った。24時間後において、胚の顎顔面領域に標識としたGFPの発現が認められ、遺伝子導入を確認することができた。また、電圧、時間およびパルスの条件設定を変えても、48時間後の生存率は低いことが明らかとなった。2.ニワトリ胚へのsiRNA発現プラスミドをもちいた遺伝子阻害siRNA発現プラスミドは、pSilencer2.1-U6ベクターを用い、いくつかのパターンを構築した。HH.Stage10〜15の胚へのエレクトロポレーションでは、8時間後に胚の顎顔面領域にGFPの発現が認められ、遺伝子導入を確認することができた。24時間後および48時間後におけるパラフィン標本で行ったin situ hybridizationにおいて顎顔面領域にL3/Lhx8遺伝子の発現は見られなかった。実体顕微鏡における形態的観察において、顎顔面領域の明らかな形態異常は観察されなかった。

The morphology of the jaw region is generated, and the formation process is complex. The structure is not symptomatic. The cause of the lip and mouth crack is not clear. L3/Lhx8 is an important link in the formation of facial and maxillofacial regions. In this study, we developed a new approach for the introduction of L3/Lhx8 gene into the human genome. 1. The pMiwIII version of the pMiwIII version of the pMi L3/Lhx8 Genome Subgroup: pMiwIII Genome Subgroup: pMiwIII 24 hours later, GFP was identified in the mouse's jaw area, and the gene was introduced. The survival rate after 48 hours is low. 2. pSilencer2.1-U6 siRNA-mediated siRNAs HH.Stage10 ~ 15 of the embryo of the embryo of the face after 8 hours to identify GFP development, gene introduction confirmed 24 hours later, 48 hours later, L3/Lhx8 cells appear in situ hybridization. The observation of morphological abnormalities in the body micro-mirror and the observation of morphological abnormalities in the facial field

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Expression and regulation of the LIM homeodomain gene L3/Lhx8 suggests a role in upper lip development of the chick embryo

DOI：
10.1007/s00429-006-0078-0
发表时间：
2006-06-01
期刊：
ANATOMY AND EMBRYOLOGY
影响因子：
0
作者：
Inoue, Masahide;Kawakami, Masayoshi;Wanaka, Akio
通讯作者：
Wanaka, Akio

Knockdown of the L3/Lhx8 gene suppresses cholinergic differentiation of murine embryonic stem cell-derived spheres

DOI：
10.1016/j.ijdevneu.2007.11.004
发表时间：
2008-04
期刊：
International Journal of Developmental Neuroscience
影响因子：
1.8
作者：
T. Manabe;K. Tatsumi;M. Inoue;H. Matsuyoshi;M. Makinodan;Takahira Yamauchi;E. Makinodan;Shohei Yokoyama-Sh
通讯作者：
T. Manabe;K. Tatsumi;M. Inoue;H. Matsuyoshi;M. Makinodan;Takahira Yamauchi;E. Makinodan;Shohei Yokoyama-Sh

L3/Lhx8 is a pivotal factor for cholinergic differentiation of mudine embryonic stem cells.

L3/Lhx8是胚胎干细胞胆碱能分化的关键因子。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Cell Death and Differentiation 23
影响因子：
0
作者：
Manabe T;Tatsumi K;Inoue M;Makinodan M;Yamauchi T;Makinodan E;Yokoyama S;Sakumura R;Wanaka A
通讯作者：
Wanaka A

Cell dissociation experiments reveal that positional information operates in the chicken frontonasal mass

细胞解离实验揭示位置信息在鸡额鼻团中起作用