網膜をモデルとした多能性前駆細胞におけるWntシグナルの役割の解明

以视网膜为模型阐明 Wnt 信号在多能祖细胞中的作用

• 批准号: 18890234
• 负责人: 中桐 志保
• 金额: $ 1.72万
• 依托单位: Osaka Bioscience Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18890234/
• 关键词: 発生・分化; 神経科学; DKK3; ノックアウトマウス; エレクトロポレーション; 網膜; 分泌型因子

発生初期の網膜で高い発現を示すことから、網膜の発生に関与することが示唆された分泌型因子DKK3のノックアウトマウスを作製した。免疫染色ならびにERG(網膜電位)によりノックアウトマウスの表現型を検討した結果、いずれにおいても野生型マウスと比較して有意差は認められなかった。現在はDKK3が発生初期の網膜にほぼ特異的に発現することを利用して、DKK3プロモーターの制御下でCreリコンビナーゼを発現するマウスを用いて網膜の発生に寄与する可能性が高い分子を時期特異的に欠失させたコンディショナルノックアウトマウスを作製することで、それらの分子の網膜細胞の分化への影響を組織学的方法によって検定しようとしている。また、網膜前駆細胞の視細胞への運命決定を司るOtx2コンディショナルノックアウトマウスを材料に行ったマイクロアレイで野生型と比較して発現レベルが低下した遺伝子群の中から分泌型であると推測された因子10種を抽出し、機能解析を行っている。それらのうち網膜をはじめとする神経系に発現が認められ、進化的に高度に保存されていた新規因子であるFam3cをアフリカツメガエルの眼を含む神経系に強制発現させた結果、腹側の網膜色素上皮細胞の欠失および眼の肥大が認められた。さらに、各種分化マーカーなどによる免疫染色を行った結果、網膜層構造が崩壊していたことから、Fam3cは網膜細胞の増殖や層構造の形成に重要な働きを担っていることが示唆された。

In the early stage of life, the high level of the network network shows that the DKK3 secretion factor, which is the secretory factor of the network, can be detected. Immunostaining showed that the results of ERG (network position) were significantly higher than those of the wild type, and the results of the table were significantly higher than those of the wild type. Now, in the early days of DKK3 life, you can see that you can make use of this, and you can use the DKK3 system to make sure that you are using the network to send messages to high-level users who are likely to be protected by Internet users. The method of cell differentiation of molecular network and the method of histology is used to determine the level of cell differentiation. In order to determine the quality of the Otx2, the pre-network cell monitoring system determines that the company is responsible for monitoring the quality of the material. The wild type is used to detect the production of the secreted protein in the subgroup of low-level products, which can be extracted and analyzed by the machine. The network system is responsible for the detection of disease, the high level of preservation of the new regulation factor, the effect of the Fam3c factor, the effect of the system on the results, and the loss of the hypertrophy of the abdominal network pigment epithelial cells. The results of immunostaining for all kinds of differentiated cells, the results of immunostaining for all kinds of differentiation tests, the results of network disintegration assay, and the formation of Fam3c network cytoskeleton colony formation assay were used to show that it is important to be responsible for immunostaining.