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羊膜由来神経幹細胞の移植による網膜組織の再建と視機能の再生

羊膜源性神经干细胞移植重建视网膜组织及视功能再生

基本信息

批准号：
19791295
负责人：
王明聡
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19791295/
关键词：
ヒト羊膜間葉細胞異種羊膜移植液性免疫応答神経系細胞分化

项目摘要

目的:ヒト羊膜間葉細胞(hAMC)は神経前駆細胞の性質を有し、in vivoで神経系細胞への分化誘導が可能である。網膜下hAMC移植後に細胞性免疫応答による拒絶が起きることを既に解明したが、更に異種hAMC移植における液性免疫応答を解析し、免疫不全宿主の網膜下でのhAMC長期生着と分化を評価した。方法:インフォームドコンセントのもとでヒト胎盤からhAMCを分離培養し、PKH26で生体染色し、免疫不全マウス(C.B17)と正常マウス(BALB/c)の正常眼網膜下に経強膜的に移植した。正常宿主から経時的に血清を採集し、総IgM、IgGをELISAで定量し、抗ヒトIgM、IgGをFACSで解析した(n=12)。陽性対照はヒトリンパ球で免疫したマウス血清とした。免疫不全宿主眼では移植後6ケ月にわたりPKH26陽性細胞の生着と網膜関連マーかーの発現を共焦点顕微鏡下で解析した(n=5)。結果:hAMC網膜下移植の宿主の血清中の総IgG量は移植後計時的に増加し、抗ヒトIgG値は有意に上昇した。免疫不全宿主の網膜下hAMCは、術後6ケ月にわたり網膜色素上皮層近傍に生着し、Galretinin、GSは陽性となった。結論:正常宿主へのhAMC網膜下異種移植後には液性免疫応答が誘導され、慢性拒絶反応が起きるリスクがある。免疫不全状態の宿主の網膜下でhAMCは長期生着し水平細胞、ミューラー細胞に分化する可能性がある。

Objective: To explore the possibility of differentiation of amniotic mesenchymal cells (hAMC) in vivo and in vitro. The cellular immune response after subretinal hAMC transplantation was analyzed, and the liquid immune response after xenotransplantation was evaluated. Methods: The placenta was isolated and cultured in vitro, PKH26 was stained in vivo, immunocompromised (C.B17), normal (BALB/c) and normal subretinal membrane was transplanted. Sera from normal hosts were collected, IgM and IgG quantified by ELISA, and anti-IgM and IgG analyzed by FACS (n=12). A positive response to the virus PKH26-positive cells were identified by confocal microscopy at 6 months after transplantation in immunocompromised host eyes (n=5). Results: The total IgG level in the serum of hAMC subretinal transplant recipients increased significantly after transplantation, while the anti-IgG level increased significantly. In immunocompromised hosts, hAMC, Galretinin and GS were found near retinal pigment epithelium at 6 months after surgery. Conclusion: After xenotransplantation of hAMC in normal host, the fluid immune response is induced and the chronic rejection reaction is induced. In immunocompromised hosts, hAMC is likely to persist in horizontal cells and differentiate into primary cells.