Synthesis of artificial chondroitin sulfates usi ng recombinant enzymes and investigation of the physiological functions

重组酶合成人工硫酸软骨素及其生理功能研究

• 批准号: 19870025
• 负责人: 杉浦 信夫
• 金额: $ 1.99万
• 依托单位: Aichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19870025/
• 关键词: 糖鎖工学; 遺伝子組換え酵素; コンドロイチン硫酸; グリコサミノグリカン; 硫酸基転移酵素; 糖転移酵素; 表面プラズモン測定; 蛍光高速液体クロマトグラフィー; コンドロイチンポリメラーゼ; 蛍光高速液体クロマト; 親和性解析; 多角度レーザー光散乱計; 固定化酵素リアクター; 質量分析機(MALDI-TOF MS)

蛍光標識コンドロイチン(PA-CH)オリゴ糖およびポリマーを大腸菌由来コンドロイチンポリメラーゼ(K4CP)で合成し、遺伝子組み換えコンドロイチン硫酸基転移酵素群で上記PA-CHを硫酸化修飾し、各種合成コンドロイチン硫酸ライブラリーを構築した。また、合成コンドロイチン硫酸オリゴ8糖(PA-CS8)の糖鎖配列を決定できる方法を確立した。合成PA-CSライブラリーを用いて表面プラズモン測定装置や蛍光高速液体クロマトグラフィーにより、CS結合性生理活性分子との親和性解析を行った。

The light identification protein (PA-CH) is a complex protein that is synthesized by E. coli, derived from PA-CH, sulfated by PA-CH, and constructed by K4CP. The method for determining the glycan chain of PA-CS8 was established. Synthetic PA-CS can be used for surface analysis, and affinity analysis of CS binding physiologically active molecules can be carried out.

项目成果

水晶発振子上でのコンドロイチンポリメラーゼの反応解析

软骨素聚合酶在晶体振荡器上的反应分析

• 发表时间: 2008
• 作者: 小寺貴之;杉浦信夫;木全弘治;森俊明;岡畑恵雄
• 通讯作者: 岡畑恵雄

コンドロイチン硫酸のガイダンス効果を検討する培養実験系の確立

硫酸软骨素引导作用培养实验体系的建立

• 发表时间: 2007
• 作者: 安藤覚;杉浦信夫;木全弘治;高橋智;一條裕之
• 通讯作者: 一條裕之

遺伝子工学を利用した糖鎖医薬品の創製-人工コンドロイチン硫酸の合成-

利用基因工程创造糖链药物-人工硫酸软骨素的合成-

• 发表时间: 2008
• 作者: 在原雅貴;左一八;渡邊一平;杉浦信夫;木全弘治;森田公一;鈴木隆;杉浦信夫
• 通讯作者: 杉浦信夫

酵素合成コンドロイチン硫酸オリゴ糖及び多糖ライブラリー

酶合成硫酸软骨素寡糖和多糖文库

• 发表时间: 2008
• 作者: 杉浦信夫;原沙緒里;木全弘治;渡辺秀人
• 通讯作者: 渡辺秀人

Sequential synthesis of chondroitin oligosaccharides by immobilized chondroitin polymerase mutants

• DOI: 10.1007/s10719-008-9105-0
• 发表时间: 2008-08-01
• 期刊: GLYCOCONJUGATE JOURNAL
• 影响因子: 3
• 作者: Sugiura, Nobuo;Shimokata, Satoshi;Watanabe, Hideto
• 通讯作者: Watanabe, Hideto