Development of fluorescent probes that detect protein phosphorylation/dephosphorylation and their application

检测蛋白质磷酸化/去磷酸化的荧光探针的研制及其应用

• 批准号: 19710185
• 负责人: MIZUKAMI Shin
• 金额: $ 2.38万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19710185/
• 关键词: 生体機能関連物質; 蛍光プローブ; 脱リン酸化; レシオ測定; pKa

分子内水素結合による水酸基のpK_aシフトを利用して、脂肪族リン酸モノエステルの脱リン酸化を検出する新規スイッチ機構を考案し、その原理によるレシオ蛍光プローブを複数合成した。これらの化合物を含む100 mM HEPES buffer (pH 7.4) に、acid phosphatase (ACP)を加え励起スペクトルを測定したところ、励起スペクトル変化が観測された。種々のホスファターゼに対する選択性を調べた結果、全てのプローブが酸性ホスファターゼに対して高い選択性を持つことを明らかにした。

使用分子内氢键引起的羟基的PK_A偏移，设计了一种新型的切换机制来检测脂肪族磷酸单酯的去磷酸化，并根据这一原则合成多重比率荧光探针。将酸性磷酸酶（ACP）添加到包含这些化合物并测量激发光谱的100 mM HEPES缓冲液（pH 7.4）中，并观察到激发光谱的变化。在检查了各种磷酸酶的选择性之后，发现所有探针对酸性磷酸酶的选择性都很高。

项目成果

新規スイッチ機構を用いたphosphataseレシオ蛍光プローブの開発

使用新型开关机制开发磷酸酶比率荧光探针

• 发表时间: 2007
• 作者: 渡辺修司;水上進;菊地和也
• 通讯作者: 菊地和也

プロテアーゼ活性を検出する^<19>F MRI プローブの開発

开发^<19>F MRI探针来检测蛋白酶活性

• 发表时间: 2008
• 作者: T. Ohtsuki;H. Kikuchi;T. Sakai;and M. Ishibashi;村田健史;高村浩由;村田健史;村田健史;村田健史;佐野将之;Shin Mizukami;Shin Mizukami;Yoshiyuki Kido;水上進;Shin Mizukami;水上進;Shin Mizukami;水上進
• 通讯作者: 水上進

遺伝子発現を検出する^<19>F MRIプローブ

^<19>F MRI探针检测基因表达

• 发表时间: 2009
• 作者: T. Ohtsuki;H. Kikuchi;T. Sakai;and M. Ishibashi;村田健史;高村浩由;村田健史;村田健史;村田健史;佐野将之;Shin Mizukami;Shin Mizukami;Yoshiyuki Kido;水上進
• 通讯作者: 水上進

タンパク質ラベル化システム

蛋白质标记系统

• 发表时间: 2008

生体分子可視化ローブの開発

生物分子可视化波瓣的开发

• 发表时间: 2007
• 作者: T. Ohtsuki;H. Kikuchi;T. Sakai;and M. Ishibashi;村田健史;高村浩由;村田健史;村田健史;村田健史;佐野将之;Shin Mizukami;Shin Mizukami;Yoshiyuki Kido;水上進;Shin Mizukami;水上進;Shin Mizukami;水上進;水上進;水上進
• 通讯作者: 水上進