Conformational dynamics during the catalytic cycle of RNA helicases studied by time-resolved fluorescence resonance energy transfer (FRET) and single molecule FRET

通过时间分辨荧光共振能量转移 (FRET) 和单分子 FRET 研究 RNA 解旋酶催化循环期间的构象动力学

• 批准号: 5365066
• 负责人: Professorin Dr. Dagmar Klostermeier
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Physikalische Chemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Independent Junior Research Groups
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2004-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5365066?language=en
• 关键词: Conformational; dynamics; during; catalytic; cycle

RNA-Helikasen katalysieren die ATP-abhängige Entwindung doppelsträngiger RNA in zellulären Schlüsselprozessen, die RNA-Umstrukturierung erfordern. Die Helikase-Aktivität wird vermutlich über nukleotidgesteuerte Konformationsänderungen moduliert. In DEAD-Box-Helikasen verhindern Mutationen im hochkonservierten SAT-Motiv die Kopplung von Nukleotidbindung und RNA-Entwindung. Die molekularen Grundlagen für den Entwindungsprozess sind jedoch unbekannt. Ich beabsichtige, nukleotid- und substratabhängige Konformationsänderungen in RNA-Helikasen sowie Änderungen der Substratkonformation mittels zeitaufgelöster Fluoreszenzspektroskopie zu untersuchen. Mit Fluoreszenzresonanzenergietransfer können Abstände im Bereich von 20-80 Å bestimmt werden. Die Korrelation von Konformationsänderungen der Helikase mit der Entwindungsaktivität wird aufzeigen, wie Helikasen die chemische Energie der ATP-Hydrolyse zum Entwinden von Helizes verwenden. Einzelmolekülexperimente werden die zeitliche Abfolge von Konformationen und damit einen Konformationszyklus definieren. Vergleiche mit Helikasen psychrophiler Organismen werden Aufschluss geben, welche spezifischen Eigenschaften es ihnen ermöglichen, die höhere Stabilität von RNA-Strukturen bei niedriger Temperatur zu überwinden. RNA-Helikasen sind möglicherweise generell an der Faltung großer RNA-Moleküle beteiligt.

在zellulären Schlüsselprozessen，die RNA-Umstrukturierung erfordern.它将成为一种新的形式和形式。在死亡的盒子里，所有的事情都发生了，这是一件很重要的事情。他说：“我不知道该怎么做了。”我在RNA-Helikasen Sowieènderungen in RNA-Helikasen Sowieènderungen der Substratkonform Mittels zeitaufelöster FluoreszenzSpektroskopie zu unterushen中使用的是核素和底物。麻省理工学院的20-80äbstimt被认为是一种新的能源转移方式。在此基础上，我们将从化学能量和ATP-水解液中提取能量。Einzelmolekül实验被认为是一种错误的行为，而不是一种错误的行为。所有的嗜冷者组织者都是自组织者，他们的特点是稳定了自己的生活，稳定了自己的生活。在这两种情况下，你会发现你是一个普通的人。