初期卵胞の体外発育法の確立および遺伝資源の保全を目的とした卵巣組織バンクの構築

希少な野生動物のメスの遺伝資源を保全する生殖介助技術の構築を目指し、モデルとしてイヌとネコの卵巣を用いて、原始卵胞の利用を想定した卵巣皮質の凍結保存と体外発育の研究を行った。イヌの未成熟卵子の発育能力を保存する卵巣組織の凍結保存方法を検討した結果、DMSOとPVPを組み合わせた凍結保護剤を用いたガラス化凍結法によって、イヌの卵巣組織は未熟な卵巣の生存性および発育能を維持した状態で凍結可能であることを示した。さらに凍結組織をラットへ移植することで、卵胞発育を誘導できることが示された。さらに、イヌの卵巣で有効であった凍結保存条件がネコの卵巣組織にも有効なことを確認した。ネコの卵巣組織については、体外培養研究も論文にまとめた。この研究はレチノイン酸をネコの卵巣組織培養下に添加することで、組織中の細胞外マトリクスのリモデリングを促すMMP9の発現を活性させ、未成熟卵子の発育を誘導できることを示した。さらに、国内の動物園の協力を得て、野生動物の卵巣組織の凍結保存（卵巣バンク）を進めた。これまで、合計で11動物園から32件、19種の野生動物の卵巣を受け入れた。それぞれ卵巣組織の凍結保存を行うとともに、組織解析のための組織固定、分子学的解析のためのRNA保存、タンパク質保存も実施した。すでに解析を一部で実施し、絶滅危惧種であるアムールトラ等、複数の種で正常な形態の卵胞を確認し、良好な状態で凍結保存を実施できたことを確認している。さらに、共同研究者の協力のもと、ニワトリをモデル動物とした未成熟卵子保存のための卵巣組織保存法の開発も進めている。昨年度は以上の研究成果を論文にまとめ、2報を国際科学雑誌で発表した。さらに、5つの国際学会・国際シンポジウム、5つの国内学会・国内シンポジウムで発表を行い、一般書の執筆、アウトリーチ活動により、社会に向けた情報発信も積極的に実施した。

希少な野生動物のメスの遺伝資源を保全する生殖介助技術の構築を目指し、モデルとしてイヌとネコの卵巣を用いて、原始卵胞の利用を想定した卵巣皮質の凍結保存と体外発育の研究を行った。イヌの未成熟卵子の発育能力を保存する卵巣組織の凍結保存方法を検討した結果、DMSOとPVPを組み合わせた凍結保護剤を用いたガラス化凍結法によって、イヌの卵巣組織は未熟な卵巣の生存性および発育能を維持した状態で凍結可能であることを示した。さらに凍結組織をラットへ移植することで、卵胞発育を誘導できることが示された。さらに、イヌの卵巣で有効であった凍結保存条件がネコの卵巣組織にも有効なことを確認した。ネコの卵巣組織については、体外培養研究も論文にまとめた。この研究はレチノイン酸をネコの卵巣組織培養下に添加することで、組織中の細胞外マトリクスのリモデリングを促すMMP9の発現を活性させ、未成熟卵子の発育を誘導できることを示した。さらに、国内の動物園の協力を得て、野生動物の卵巣組織の凍結保存（卵巣バンク）を進めた。これまで、合計で11動物園から32件、19種の野生動物の卵巣を受け入れた。それぞれ卵巣組織の凍結保存を行うとともに、組織解析のための組織固定、分子学的解析のためのRNA保存、タンパク質保存も実施した。すでに解析を一部で実施し、絶滅危惧種であるアムールトラ等、複数の種で正常な形態の卵胞を確認し、良好な状態で凍結保存を実施できたことを確認している。さらに、共同研究者の協力のもと、ニワトリをモデル動物とした未成熟卵子保存のための卵巣組織保存法の開発も進めている。昨年度は以上の研究成果を論文にまとめ、2報を国際科学雑誌で発表した。さらに、5つの国際学会・国際シンポジウム、5つの国内学会・国内シンポジウムで発表を行い、一般書の執筆、アウトリーチ活動により、社会に向けた情報発信も積極的に実施した。