小児肝移植後の長期成績向上に向けたマイクロRNAを標的とした核酸治療の開発

开发针对 microRNA 的核酸疗法以改善小儿肝移植后的长期结果

• 批准号: 16K11344
• 负责人: 田中 夏美
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Hyogo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16K11344/
• 关键词: 線維化因子; 肝移植; マイクロRNA; 小児; 長期成績

小児肝移植を実施された患者に対し、臨床上の定期的肝生検のスケジュールに従って肝移植後1,2,3,5,7,10,15年目に定期肝生検を実施した。定期的肝生検は局麻下ないしは全身麻酔下に生検針を用いて、移植肝の肝組織を採取した。定期的肝生検の実施時に、通常の病理検査に使用した残余検体の一部を研究目的に使用した。採取した組織はホルマリンと標本保存液に浸透した。採取した肝組織に対し通常のH&E染色、特殊染色を実施して拒絶の程度、線維化の程度の評価を行った。組織よりキットを用いてRNAを抽出してRT-PCRによってｃDNAパネルを作成した。cDNAパネルについては後ほどsiRNAの検出用に保存した。他の肝線維化診断マーカーとしてM2BPGi,ヒアルロン酸、4型コラーゲン、肝逸脱酵素の測定を行った。しかしながら研究代表者の異動に伴い、大阪大学との連携を進める努力をしてきたが、臨床検体の収集が当初の予定より遅れたため研究期間中に研究に使用できる十分な検体を収集することが困難と判断し、研究を最終的に中止した。

Small liver transplantation is performed on patients, and regular clinical liver monitoring is performed at 1, 2, 3, 5, 7, 10, and 15 years after liver transplantation. Regular liver biopsy is performed under local anesthesia or general anesthesia, and liver tissue is harvested. Regular liver biopsies are used for routine pathological examination and as part of the study. Take the tissue and preserve it. To evaluate the degree of rejection and linear maintenance of normal H&E staining and special staining of liver tissues. RNA was extracted from tissue by RT-PCR and cDNA was generated. cDNA production process and subsequent siRNA detection and preservation He performed liver maintenance diagnostic tests such as M2BPGi, ALU, type 4 ALU, and ALU. The research representative's change, Osaka University's connection, the clinical sample collection, the initial determination, the research period, the ten sample collection, the final determination, and the final termination.