熱傷創部の植皮術に適した３次元培養皮膚作成における脂肪由来間葉系幹細胞の機能解析

脂肪间充质干细胞在制作适合烧伤创面植皮的三维培养皮肤中的功能分析

• 批准号: 16K11408
• 负责人: 小網 博之
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Saga University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16K11408/
• 关键词: 間葉系幹細胞; ３次元皮膚培養; 線維芽細胞; 血管内皮細胞; ケラチノサイト; スフェロイド; HA matrix; 皮膚パッチ; 3次元皮膚培養; 脂肪由来間葉系幹細胞; HA-Matrix; 3次元培養; 3次元培養皮膚; 組織体形成装置; 皮膚移植

我々は、これまでにも各細胞腫を用いた細胞凝集塊（スフェロイド）形成を基本単位とした3次元皮膚培養を行い、熱傷創部に移植するのに耐えうる皮膚パッチ作成を試みた。本研究では、近年注目されてきた脂肪由来間葉系幹細胞に注目し、従来の皮膚パッチに加えることによる皮膚パッチの構造変化や機能の変化などを解析することを目的とした。線維芽細胞や血管内皮細胞、ケラチノサイトと同様に、間葉系幹細胞も単培養を繰り返し、スフェロイドを作成する。そして、毎回、組み合わせやその比率を変えることにより作成される皮膚パッチの構造を肉眼観察ならびに光学顕微鏡による観察でそれぞれ評価し、その直径の推移や形態の変化を数日間に渡り記録した。研究期間内に10種類の異なる皮膚パッチをそれぞれ作成することに成功した。また、一部の検体については、血管内皮細胞に特異的なCD31やCD34に対する免疫染色も行いその構造を観察した。また、この研究期間内に、HA-matrixという細胞外マトリックスを豊富に含むノロゲンゲ抽出物を、スフェロイド作成に用い、スフェロイド作成への効果を合わせて評価した。特に濃度と作成されるスフェロイド系の相関や作成行程における影響なども考察し、よりスムーズなスフェロイド作成に対するHA-matrixの有用性も評価した。研究全体としては、異動に伴う研究期間の途中終了もあったが、残念ながら植皮に耐えうる皮膚パッチを作成することができず、後半の動物を使った植皮実験までは進めることができなかった。

We try to create a basic unit of cell aggregation for each cell mass, for three-dimensional skin culture, for transplantation of heat wounds, and for resistance to skin aggregation. This study is aimed at analyzing the structure and function of adipose tissue derived mesenchymal stem cells. Stem cells, vascular endothelial cells, mesenchymal stem cells, etc. The ratio of the skin to the diameter of the skin is different from that of the skin to the diameter of the skin. 10 different types of skin during the study The structure of CD31 and CD34 specific immunostaining for vascular endothelial cells was observed in some of the tissues. During the study period, HA-matrix and extracellular matrix were used to evaluate the synthesis of extracellular matrix and extracellular matrix. The effects of the special concentration on the preparation of the HA-matrix were investigated. The study was conducted on the basis of the results of the study.