老化制御因子による骨芽細胞と軟骨細胞の分化制御メカニズムの解析

衰老调节因子控制成骨细胞和软骨细胞分化的机制分析

• 批准号: 16K11462
• 负责人: 内藤 昌子
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2016
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2016-04-01 至 2018-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16K11462/
• 关键词: 骨芽細胞; 細胞老化; 核ラミナ; コラーゲン; 軟骨細胞; 核内膜; 早期老化症; 細胞分化; 細胞・組織; シグナル伝達; 老化; 骨代謝; 軟骨

今年度は老化制御因子が骨芽細胞分化に及ぼす影響の解析を中心におこなった。平成28年度に樹立したLamin A遺伝子、またはC末アミノ酸欠損型Lamin A変異体の遺伝子を導入したMC3T3E1細胞を用いて骨芽細胞分化能を評価した。Lamin Aの過剰発現は、コントロールと比較すると石灰化を伴う骨芽細胞分化を促進することが観察された。興味深いことにestrogen receptor antagonistであるfulvestrantを分化誘導培地に添加し、MC3T3E1細胞の石灰化や骨芽細胞分化を抑制する状況下においても、Lamin Aの過剰発現により石灰化が部分的に保持されていた。次に早期老化症を引き起こすLamin AのC末アミノ酸欠損型変異体(Lamin A dC50)を導入すると、コントロールと比較すると骨芽細胞分化が抑制された。Lamin A dC50の導入によりβ-cateninタンパク質の発現量とTCF/LEF転写活性は抑制しておりWnt/β-cateninシグナルが抑制されていることが示唆された。Ⅰ型コラーゲン抗体を用いた免疫染色を行い骨基質産生能の変化を検討したところ、Lamin A dC50の遺伝子導入により細胞質内と細胞質外に局在するⅠ型コラーゲンの染色性が低く観察された。コラーゲン代謝関連遺伝子の発現を検討したところ、Lamin A dC50の遺伝子導入によりリシルオキシダーゼ（Lox）遺伝子発現が減少し、MMP13遺伝子発現が増加することが観察された。Lamin A dC50の遺伝子導入は、骨基質タンパク質であるコラーゲンの蓄積が抑制することで骨芽細胞の石灰化を抑制することが考えられた。

This year, <s:1> aging control factors が bone bud cell differentiation に and ぼす effects <s:1> analysis を center にお なった なった なった なった なった. Pp.47-53 28 year に set し た Lamin A heritage 伝, ま た は C at the end of the ア ミ ノ acid owe damage type Lamin A - variant の heritage 伝 son を import し た MC3T3E1 cells を using い て bone bud differentiation can を review 価 し た. Lamin A の before turning 発 は, コ ン ト ロ ー ル と compare す る と calcification を with う bone bud differentiation を promote す る こ と が 観 examine さ れ た. Takes deep い こ と に estrogen receptor antagonist で あ る fulvestrant を differentiation inducing the petty に add し, MC3T3E1 cell の calcification や bud differentiation を inhibit bone す る condition に お い て も, Lamin The に of the が part of the <s:1> that has been overprolapsed remains されて た た た. Since primary に early aging disease を き こ す Lamin A の C late ア ミ ノ acid type owe loss - variants (Lamin A dC50) を import す る と, コ ン ト ロ ー ル と compare す る と bud differentiation が inhibit bone さ れ た. Lamin A dC50 の import に よ り beta catenin タ ン パ ク qualitative の 発 now quantity と TCF/LEF planning write inhibition し は て お り Wnt/beta - catenin シ グ ナ ル が inhibit さ れ て い る こ と が in stopping さ れ た. Type Ⅰ コ ラ ー ゲ を ン antibody with い た immune dyeing line を い bone matrix can produce の variations change を beg し 検 た と こ ろ, Lamin A dC50 の heritage 伝 son import に よ outside the cytoplasm と り cytoplasm に bureau in す る Ⅰ type コ ラ ー ゲ ン の dyeing が low く 観 examine さ れ た. コ ラ ー ゲ ン metabolic masato even heritage 伝 son の 発 を now beg し 検 た と こ ろ, Lamin A dC50 の posthumous son 伝 import に よ り リ シ ル オ キ シ ダ ー ゼ (Lox) heritage 伝 発 が reduce し now, traces of MMP13 伝 son 発 now が raised す る こ と が 観 examine さ れ た. Lamin A dC50 の heritage 伝 import は, bone matrix タ ン パ ク qualitative で あ る コ ラ ー ゲ ン の accumulation が inhibit す る こ と で bone bud cells の calcification を inhibit す る こ と が exam え ら れ た.

项目成果

軟骨細胞分化と増殖制御におけるpromyelocytic leukaemia zinc finger (PLZF)転写因子の役割について

早幼粒细胞白血病锌指（PLZF）转录因子在控制软骨细胞分化和增殖中的作用

• 发表时间: 2016
• 作者: 内藤昌子;笠原正彰;大橋晶子;高橋富久
• 通讯作者: 高橋富久

Tetrahydrobiopterin Supplementation: Elevation of Tissue Biopterin Levels Accompanied by a Relative Increase in Dihydrobiopterin in the Blood and the Role of Probenecid-Sensitive Uptake in Scavenging Dihydrobiopterin in the Liver and Kidney of Rats.

• DOI: 10.1371/journal.pone.0164305
• 发表时间: 2016
• 期刊: PloS one
• 影响因子: 3.7
• 作者: Ohashi A;Saeki Y;Harada T;Naito M;Takahashi T;Aizawa S;Hasegawa H
• 通讯作者: Hasegawa H

Lamin A overexpression promotes osteoblast differentiation and calcification in the MC3T3-E1 preosteoblastic cell line.

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2017.02.110
• 发表时间: 2017-07
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: Naoya Tsukune;M. Naito;Tatsuya Kubota;Y. Ozawa;Mayu Nagao;Akiko Ohashi;Shuichi Sato;Tomihisa Takahashi