菌体外核酸生産菌を用いた環状RNA医薬の連続生産・回収システムの開発

利用胞外核酸产生菌开发环状RNA药物连续生产和回收系统

基本信息

  • 批准号:
    17K07719
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 3.08万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
  • 财政年份:
    2017
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2017-04-01 至 2020-03-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ロドブルム属細菌を利用した菌体外人工RNAの生産方法および回収方法の開発に関する研究として、以下のことを達成した。1.菌体外人工RNA生産の連続生産および回収を可能とする凝集体形成変異体の作成2.ロドブルム属細菌の菌体凝集に関与する細胞間コミュニケーション物質の同定1については、紫外線変異導入を行い、通常では菌凝集の起こらない冨栄用条件においても菌凝集を形成する変異体を2株取得することに成功した。また、ゲノムシーケンシングにより、変異導入箇所(インデル含む)を明らかにし、どちらの変異株においても凝集に関連する遺伝子に変異が導入されていることが確かめられた。また、これらの変異株についても菌体外にRNAを生産することも示唆された。また、バッチ系ではあるが、連続培養しつつ培養液中に生産された菌体外拡散をフィルターろ過のによって回収することも確認された。従来では、菌体外核酸の回収には菌体の遠心分離は必須であったが、本変異株を用いればこれらの遠心分離操作をする必要がなく、培養量のスケールアップ化も容易になると期待される。2については、菌間コミュニケーション物質の同定について、培養液から抽出したものについて精密質量分析を行い、新規のアシルホモセリンラクトン(3-OH-C20-HSL)を同定した。また、バイオアッセイ実験によって、この物質が確かに細胞間コミュニケーションに利用されることを明らかにした。グラム陰性細菌のアシルホモセリンラクトン類のアシル鎖長はこれまで4から18であるとされてきたが、今回の発見は、これまでの知見を大きく刷新する新たな発見となり、今後の長鎖アシルホモセリンラクトンによる菌間コミュニケーション研究のすそ野を広げることに貢献すると期待される。
The bacteria of the genus Escherichia coli were tested by artificial RNA bioassay in vitro, and the results showed that the following samples were successfully established. 1. Artificial RNA bioassay in vitro. It is possible that condensed bodies can be formed by agglutination of bacteria in vitro. Bacteria agglutination is identical to that of intercellular bacteria. Usually, two strains of bacteria were successfully formed by bacterial agglutination. Please tell me that you are not allowed to do so, and that you can make sure that you do not know if you are going to be able to do so. The bacteria were infected with RNA in vitro, and the bacteria were infected in vitro. The samples were isolated from the bacteria in the culture solution and confirmed that the bacteria were dispersed in vitro. The detection of nucleic acid in vitro and the isolation of the heart of the bacteria must be carried out. This strain is operated on the basis of the operation of the separation of the bacteria. It is necessary to do the necessary work, and the amount of culture is very easy to predict. 2. In the laboratory, in the bacteria and in the bacteria, the equipment is the same as that in the laboratory, the culture liquid is extracted, the precision measurement is analyzed, and the new regulation is used to determine the precision of the instrument (3-OH-C20-HSL). Make sure that the cell phone is used to detect the temperature in the cell, and that the device can be used to detect the information in the cell. There is a lot of information about sexual bacteria and bacteria. This time, I have heard about it. I have heard about it. I have heard about it. In the future, we are looking forward to a long-term study on the relationship between bacteria and bacteria in the future.

项目成果

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Involvement of the response regulator CtrA in the extracellular DNA production of the marine bacterium <i>Rhodovulum sulfidophilum</i>
反应调节因子 CtrA 参与海洋细菌 <i>Rhodovulum sulfidophilum</i> 的胞外 DNA 产生
  • DOI:
    10.2323/jgam.2017.08.003
  • 发表时间:
    2018
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    15.H. Komatsu;J. Yamamoto;N. Nagao;Suzuki;T. Ohyama;S. Umekage and Y. Kikuchi
  • 通讯作者:
    S. Umekage and Y. Kikuchi
Identification of novel long chain N-acylhomoserine lactones of chain length C20 from the marine phototrophic bacterium Rhodovulum sulfidophilum
  • DOI:
    10.1080/09168451.2018.1490168
  • 发表时间:
    2018-01-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    1.6
  • 作者:
    Arashida, Naoko;Shimbo, Kazutaka;Yasueda, Hisashi
  • 通讯作者:
    Yasueda, Hisashi
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  • 通讯作者:
    Fukui Kiichi
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  • 通讯作者:
    梅影 創

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    $ 3.08万
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    Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)

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    2014
  • 资助金额:
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  • 资助金额:
    $ 3.08万
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