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アストロサイト容積調節機構における酸素依存的アクアポリン4の機能制御機構

氧依赖性水通道蛋白4在星形胶质细胞体积调节机制中的功能控制机制

基本信息

批准号：
23770154
负责人：
行武良哲
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Keio University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2011
资助国家：
日本
起止时间：
2011 至 2012
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23770154/
关键词：
アクアポリンアストロサイト細胞容積調節機構低酸素

项目摘要

アストロサイト容積調節機構における酸素依存的アクアポリン4(AQP4)の機能制御機構という課題のもと、脳虚血時に水分子が果たす役割をAQP4の機能制御を通して解明することが本研究の目的である。脳の機能を維持するために重要な機構として細胞容積調節機構がある。アストロサイトは低浸透圧刺激などで膨張しても、細胞容積調節機構により正常の容積に戻る。低酸素下等でこの機構が破綻すると脳浮腫形成につながる。細胞容積が正常に戻る際にはAQP4を介した水分子の輸送制御が必要であると考えられるが、その分子調節機構は明らかでない。昨年度は脳梗塞モデルマウスを野生型とAQP4KOマウスで作製し、脳の浸透圧物質やエネルギー代謝産物の網羅的定量解析を行った。その結果、浸透圧物質の濃度変化は野生型とAQP4KOマウスでは差が認められなかったものの、野生型の患側で減少したATPがAQP4KOマウスでは維持され、GSHがAQP4KOマウスでは増加が認められなかった。すなわち、AQP4KOマウスでは脳梗塞の細胞ダメージが軽減されているという証拠を得た。得られた証拠をもとに、本年度はAQP4KOマウスにおいて脳のダメージ軽減におけるアストロサイトの役割を確認するため、代謝産物や浸透圧物質をマウス脳の切片を用いて代謝解剖学的解析を試みた。マウスの脳梗塞モデルを作成し、in situ凍結法によって凍結させたマウスの脳から凍結切片を作成した。作成した凍結切片にマトリックスをスプレーで塗布し、MALDI-TOFMSでアニオンの代謝産物の検出を行う系を構築した。特にマトリックス(9AA)を塗布する技法の検討に時間を割き、ケミカルプリンター法とスプレー法の比較検討を行った。その結果、スプレー法でムラなくマトリックスの塗布を行える条件を見出した。

The purpose of this study is to clarify the functional control mechanism of AQP4, which regulates the capacity of water molecules in the body. The important mechanism for maintaining the function of the cell is the mechanism for regulating the cell volume. The cell volume regulation mechanism is the normal volume regulation mechanism. Low acid content, low acid content, low acid When cell volume is normal, AQP4 is necessary to regulate the transport of water molecules. A quantitative analysis of the wild type and AQP4KO metabolites was performed yesterday. As a result, the concentration of saturating substances changed from wild type to AQP4KO, and the concentration of saturating substances decreased from wild type to AQP4KO, and the concentration of saturating substances increased from wild type to AQP4KO. Aqp4KO is the best way to protect your health. This year, AQP4KO was used to analyze metabolic anatomy. It's called "freezing." To construct a system for the detection of metabolites in MALDI-TOFMS Special coating techniques are discussed in detail. The results of the coating process are shown below.