インスレーターを介した糖尿病発症機構の解明

阐明绝缘体介导的糖尿病发生机制

• 批准号: 23791033
• 负责人: 三代 剛
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Shimane University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2011
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2011 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-23791033/
• 关键词: 酪酸; MFGE8; アポトーシス; 16SrRNAシークエンス; 16S rRNAシークエンス

C57BL6/N(WI)マウスに2.5%DSSを服用させると経時的な体重減少が認められる。この時、腸内短鎖脂肪酸濃渡の変化を測定した所、酢酸、フマル酸やプロピオン酸の濃度変化は無かったが、酪酸濃度のみがDSS服用時に半減した。腸内細菌産生産物の一種である短鎖脂肪酸(酪酸)を、至摘濃度にて培養細胞(NCI-H716)上清内に添加した。特に酪酸はヒストン脱アセチル化複合体阻害作用を有しており、種々の遺伝子発現活性化に関与している。酪酸添加における培養細胞からmRNAを単離し、cDNAに変換した後にDNAマイクロアレイを用いて遺伝子発現変化を解析した。検討項目としていたGLP-1遺伝子は、発現量が約25%程度に減少していた。一方で、細胞接着因子であるMFGE8は5倍程度の顕著な発現上昇を認めており、この遺伝子について機能解析を進めて行く事とした。クロマチン免疫沈降法を用いて、MFGE8プロモーター領或のヒストンH3K9アセチル化を評価した所、酪酸添加時、経時的に同領域のアセチル化が増加している結果が得られた。次にWTマウス及びMFGE8ノックアウト(KO)マウスに対して、各々DSSの投与を行いつつ、加えて酪酸の経直腸内投与をを行った。まずWTマウス及びKOマウス各々の腸内細菌叢を16S rRNAメタゲノム解析にて調べたが、菌叢の大きな差異はみられなかった。コントロールマウス(生理的食塩水投与)に比べて、酪酸の投与を受けたWTマウスは、有意な体重減少の抑制がみられたものの、酪酸投与KOマウスでは有意差は認められなかった。ELISA法を用いて、腸組織における炎症パラメーターの測定も行ったが、やはり酪酸投与を受けたWTマウスでは、炎症性サイトカインの発現抑制がみられたが、KOマウスでは有意な差はみられなかった。

C57BL6/N(WI)マウスに2.5%DSSさせると経There is no evidence of weight loss when taking させると経. Measurement of the concentration of short-locked fatty acids in the intestine and the change of the concentration of short-locked fatty acids in the intestines The concentration of オン acid has been changed to zero, and the concentration of butyric acid has been reduced to half when taking DSS. Short-locked fatty acid (butyric acid), a product produced by intestinal bacteria, is added to the supernatant of cultured cells (NCI-H716) at a high concentration. The blocking effect of the special butyric acid deconjugation complex is the same as that of the しており and the 々の缝子発 is now activated. Butyric acid was added to the cultured cells, and the mRNA was isolated, and the cDNA was converted into DNA. The GLP-1 legacy of the research project has been reduced by approximately 25%. On the one hand, the cell binding factor MFGE8 is 5 times higher than the original one, and the functional analysis is done. The immunosedimentation method of クロマチンをいて, MFGE8 プロモーター or のヒストンH3K9 アセチルWhen adding butyric acid, the same field as when adding butyric acid, and when the chemical is added, the result will be the same.にWTマウス和びMFGE8ノックアウト(KO)マウスに対して, Each dose of DSS is administered intrarectally and the drug is administered intrarectally with the addition of butyric acid.まずWTマウス and びKOマウス々のIntestinal Bacteria を16S rRNA メタゲノムANALYSIS にて Adjustment べたが、Bacteria の大きなDIFFERENCE はみられなかった.コントロールマウス(physiological food and water injection) に比べて, butyric acid injection and をReceived WTマウスは, there are Inhibition of body weight loss, butyric acid administration, KO マウスでは intentional difference, recognition of the difference. ELISA method for the use of いて, intestinal tissue inflammation パラメーターの measurement of も行ったが, やはりbutyric acid administration をReceived けたW Tマウスでは, inflammatory サイトカインの発appears to suppress がみられたが, KOマウスでは intentional なdifferent はみられなかった.