複数の機能的マーカーを用いた炎症性腸疾患における腸炎惹起性メモリー幹細胞の探求

使用多种功能标记物探索炎症性肠病中的肠致病性记忆干细胞

• 批准号: 24590933
• 负责人: 根本 泰宏
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24590933/
• 关键词: メモリーT細胞; IL-7; CD4; 長期培養; 炎症性腸疾患; メモリー幹細胞

少数の細胞集団に照準を絞った、より有効かつ安全な炎症性腸疾患分子標的治療の開発を目的として、炎症性腸疾患モデルマウスにおける腸炎惹起性メモリーCD4+ T細胞のうち、腸炎誘導能、生存能の高い“腸炎惹起性メモリー幹細胞”の存在を検証するため以下の研究を行った。メモリーT細胞維持因子であるIL-7によって腸炎惹起性メモリーT細胞をin vitroで長期間培養する事によって、より生存能の高い細胞集団の選別を試みた。CD4+CD45RBhigh T細胞移入腸炎マウス大腸粘膜CD4+メモリーT細胞を、TCR刺激を行わずにIL-2、IL-15、IL-7の添加にて培養したところ、IL-7のみ4週間培養可能であり、CFSEによる細胞分裂の解析ではメモリーT細胞は抗原消失後の生体内と同様に、quiescentな状態で維持されており、週１回程度の間欠的な分裂が見られた。腸炎マウスの脾臓、骨髄、腸間膜リンパ節CD4+メモリーT細胞もIL-7単独で培養可能であったが、正常マウスのCD4+ T細胞はIL-7単独培養では4週間生存できなかった。8週間培養後の腸炎マウス大腸粘膜CD4+メモリーT細胞は抗アポトーシス分子であるBcl-2を培養前に比して著明に高発現しており、更に腸管粘膜へのhoming receptorとリンパ節へのhoming receptorを合わせ持ち、メモリーマーカー、エフェクターマーカーを同時に発現する、既存の分類には当てはまらない新たな細胞分画としての特徴を有していた。IL-7単独で4週間培養した大腸粘膜CD4+メモリーT細胞と8週間培養した大腸粘膜CD4+メモリーT細胞を新たなSCIDマウスに移入したところ、後者の方で強い腸炎を発症した。IL-7による腸炎惹起性メモリーT細胞の長期培養法によって、生存能、腸炎惹起能の強いユニークな細胞集団が同定された。

A small number of cell clusters are targeted, effective and safe for the development of molecular target therapy for inflammatory bowel disease. The following research is carried out to demonstrate the existence of CD4 + T cells, enteritis induction energy, and survival energy in inflammatory bowel disease. T cell maintenance factors such as IL-7, inflammatory response and selection of T cell populations in vitro for long-term culture CD4 + CD45 RBhigh T cells transplanted into the colon mucosa CD4 + RBhigh T cells stimulated by TCR and IL-2, IL-15 and IL-7 were cultured for 4 weeks, and the analysis of cell division after CFSE antigen disappeared was possible. CD4 + T cells from enteritis, bone marrow, and intestinal membrane may be cultured alone for 4 weeks, while normal CD4 + T cells may be cultured alone for 4 weeks. After 8 weeks of culture, CD4 + T cells from intestinal mucosa showed higher expression of Bcl-2 than those from pre-culture, and the homing receptor of intestinal mucosa showed higher expression of Bcl-2 than that from pre-culture. IL-7 alone was used to culture CD4 + T cells from colorectal mucosa for 4 weeks and CD4 + T cells from colorectal mucosa for 8 weeks. IL-7-induced inflammatory T cell proliferation in long-term culture

项目成果

INTESTINE Vol.16

肠道 Vol.16

• 发表时间: 2012
• 作者: 根本泰宏;金井隆典;渡辺 守
• 通讯作者: 渡辺 守

Regeneration of damaged colon epithelium by transplanted colon Lgr5+ stem cells maintained and expanded in vitro.

通过移植的结肠 Lgr5 干细胞在体外维持和扩增受损的结肠上皮的再生。

• 作者: Yui S;Watanabe M et.al.
• 通讯作者: Watanabe M et.al.

Colitogenic effector memory CD4+ T cells develop Th1/Th17 mediated interstitial pneumonia independent to intestinal bacterial antigens.

致结肠炎效应记忆 CD4 T 细胞产生 Th1/Th17 介导的间质性肺炎，与肠道细菌抗原无关。

• 作者: Nemoto Y;Watanabe M et al
• 通讯作者: Watanabe M et al

消化器と免疫 49巻

消化系统与免疫第49卷

• 发表时间: 2012
• 作者: 根本泰宏;金井隆典;渡辺 守;根本泰宏
• 通讯作者: 根本泰宏

リンパ学 35巻

淋巴学第 35 卷

• 发表时间: 2012
• 作者: 根本泰宏;金井隆典;渡辺 守
• 通讯作者: 渡辺 守