複数の機能的マーカーを用いた炎症性腸疾患における腸炎惹起性メモリー幹細胞の探求

使用多种功能标记物探索炎症性肠病中的肠致病性记忆干细胞

• 批准号: 24590933
• 负责人: 根本 泰宏
• 金额: $ 3.33万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2013-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24590933/
• 关键词: メモリーT細胞; IL-7; CD4; 長期培養; 炎症性腸疾患; メモリー幹細胞

少数の細胞集団に照準を絞った、より有効かつ安全な炎症性腸疾患分子標的治療の開発を目的として、炎症性腸疾患モデルマウスにおける腸炎惹起性メモリーCD4+ T細胞のうち、腸炎誘導能、生存能の高い“腸炎惹起性メモリー幹細胞”の存在を検証するため以下の研究を行った。メモリーT細胞維持因子であるIL-7によって腸炎惹起性メモリーT細胞をin vitroで長期間培養する事によって、より生存能の高い細胞集団の選別を試みた。CD4+CD45RBhigh T細胞移入腸炎マウス大腸粘膜CD4+メモリーT細胞を、TCR刺激を行わずにIL-2、IL-15、IL-7の添加にて培養したところ、IL-7のみ4週間培養可能であり、CFSEによる細胞分裂の解析ではメモリーT細胞は抗原消失後の生体内と同様に、quiescentな状態で維持されており、週１回程度の間欠的な分裂が見られた。腸炎マウスの脾臓、骨髄、腸間膜リンパ節CD4+メモリーT細胞もIL-7単独で培養可能であったが、正常マウスのCD4+ T細胞はIL-7単独培養では4週間生存できなかった。8週間培養後の腸炎マウス大腸粘膜CD4+メモリーT細胞は抗アポトーシス分子であるBcl-2を培養前に比して著明に高発現しており、更に腸管粘膜へのhoming receptorとリンパ節へのhoming receptorを合わせ持ち、メモリーマーカー、エフェクターマーカーを同時に発現する、既存の分類には当てはまらない新たな細胞分画としての特徴を有していた。IL-7単独で4週間培養した大腸粘膜CD4+メモリーT細胞と8週間培養した大腸粘膜CD4+メモリーT細胞を新たなSCIDマウスに移入したところ、後者の方で強い腸炎を発症した。IL-7による腸炎惹起性メモリーT細胞の長期培養法によって、生存能、腸炎惹起能の強いユニークな細胞集団が同定された。

为了为炎症性肠病开发一种更有效，更安全的分子靶向治疗，我们进行了以下研究，以验证“诱导肠炎的记忆干细胞”的存在，该研究高度能力诱导肠炎的肠炎肠炎和活力诱导炎症性肠疾病模型的小鼠模型中诱导肠炎的记忆CD4+ T细胞。我们试图通过使用记忆T细胞维持因子IL-7在长时间内长期培养肠炎记忆T细胞来选择更可行的细胞种群。 CD4+ CD45RBHIGH T细胞转移肠道感染：CD4+记忆T细胞在无TCR刺激的情况下添加IL-2，IL-15和IL-7培养CD4+记忆T细胞，并且可以将IL-7单独培养4周。在使用CFSE对细胞分裂的分析中，记忆T细胞保持在静止状态，就像抗原消失后的体内一样，观察到间歇性分裂大约每周一次。脾脏，骨髓和肠系膜淋巴结CD4+肠炎小鼠的记忆T细胞也可以单独使用IL-7培养，但是正常小鼠的CD4+ T细胞在单独的IL-7培养中无法在IL-7培养中存活4周。经过8周的培养，肠炎小鼠的CD4+记忆T细胞比培养之前的表达明显更高，抗凋亡分子Bcl-2，其特征是新细胞分数不属于现有分类，并具有用于肠道粘膜的归巢受体，淋巴结型淋巴结式记忆和同时记忆的标志物和标志物的归因受体。当单独用IL-7和结肠粘膜CD4+记忆T细胞培养4周的结肠粘膜CD4+记忆T细胞将培养8周的结肠粘膜CD4+记忆T细胞转移到新的SCID小鼠中时，后者出现了严重的肠炎。通过IL-7诱导肠炎的长期培养方法鉴定出具有强生存力和诱导肠炎的独特细胞种群。

项目成果

Regeneration of damaged colon epithelium by transplanted colon Lgr5+ stem cells maintained and expanded in vitro.

通过移植的结肠 Lgr5 干细胞在体外维持和扩增受损的结肠上皮的再生。

• 作者: Yui S;Watanabe M et.al.
• 通讯作者: Watanabe M et.al.

INTESTINE Vol.16

肠道 Vol.16

• 发表时间: 2012
• 作者: 根本泰宏;金井隆典;渡辺 守
• 通讯作者: 渡辺 守

消化器と免疫 49巻

消化系统与免疫第49卷

• 发表时间: 2012
• 作者: 根本泰宏;金井隆典;渡辺 守;根本泰宏
• 通讯作者: 根本泰宏

Colitogenic effector memory CD4+ T cells develop Th1/Th17 mediated interstitial pneumonia independent to intestinal bacterial antigens.

致结肠炎效应记忆 CD4 T 细胞产生 Th1/Th17 介导的间质性肺炎，与肠道细菌抗原无关。

• 作者: Nemoto Y;Watanabe M et al
• 通讯作者: Watanabe M et al

臨床免疫・アレルギー科 57巻

临床免疫学/过敏第 57 卷

• 发表时间: 2012
• 作者: 根本泰宏;渡辺 守
• 通讯作者: 渡辺 守