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大腸菌の染色体とFプラスミドの分配における局在振動タンパク質群の役割の解明

阐明局部振荡蛋白在大肠杆菌染色体和 F 质粒分离中的作用

基本信息

批准号：
08J00635
负责人：
足立隼
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

大腸菌の染色体分配に関わる局在振動タンパク質群の解析については、DNAに負の超螺旋(螺旋構造を持つ物質がさらに全体として大きな螺旋を形成すること。負とは元の螺旋と逆方向。)を形成させ、DNAが連結したカテナンを解消する酵素DNAジャイレースの阻害剤ノボビオシン、また超螺旋とカテナンを解消する酵素トポイソメラーゼIV変異株・DNA構造タンパク質の欠失変異株(ΔMukB変異株)・膜タンパク質透過酵素遺伝子secA変異株・secA ΔMukB二重変異株を用いて、pUC19プラスミド(小サイズの自律複製DNA)のカテナン形成及び超螺旋形成のクロロキンを用いた二次元電気泳動による構造解析を行った。その結果、secAに関して新規にカテナンを解消及び負の超螺旋を形成することに関わるという結果を得た。MukBもカテナンの解消に関わっていた。ノボビオシン及びΔMukB変異株・secA変異株・secA ΔMukB二重変異株を用いた解析により、SecAのプラスミドトポロジー(構造)に関する働きはMukBとDNAジャイレース、そしておそらくはトポイソメラーゼIVを介したものであることを発見した。これは従来DNAとは関係がないと思われていた大腸菌の膜タンパク質透過酵素SecAが細胞内でのDNAのトポロジーの制御に中心的に関わるという強力な証拠であり、バクテリアの染色体分配の研究に新規概念を提供するものである。また、局在振動タンパク質群の細胞内局在のダイナミクスの詳細な画像を得るため、京都大学大学院医学研究科の渡邊直樹准教授の助けを得て、ダイナミクスの画像を全て撮り直して解析した。これらの結果と、研究者自身の以前の報告及び局在振動タンパク質群の変異株で見られる細胞伸長がSOS応答(DNA傷害応答)でないこと、SecAの阻害は染色体の複製は顕著に阻害しないことなどの結果と合わせ、現在論文の投稿中である。

Rhizoctonia racemosus chromosome distribution laboratory is in the process of vibrating the colony of bacteria to analyze the DNA and DNA the superhelix (helix) to form a helix. The helix is in the opposite direction.) The formation and purification of the enzyme DNA, superhelix, enzyme, enzyme The formation and superhelix formation of pUC19 electrophoretic electrophoretic spectroscopy (DNA) is used to analyze the two-dimensional electrophoretic behavior. The result of the experiment, the elimination of the new rule of law and the formation of the superhelix of the secA, the results of the test were good. MukB, please release the message, please. The two strains of secA, secA and Δ MukB, were used to analyze the data, and the SecA was used to analyze the data. The SecA was used to analyze the MukB and DNA strains. This is an important part of the study of chromosome distribution in the center of the center for the study of chromosome distribution in the center of the center for the study of chromosome distribution in the center of the center for the study of chromosomal distribution, the concept of new regulations is provided by the enzyme SecA, which is used to penetrate the enzymes in the SecA cell. The picture of the doctor, the associate professor of the Graduate School of Medical Research, Kyoto University, and the portrait of the doctor in the Graduate School of Medicine, Kyoto University, Kyoto University and Kyoto University. The results of the experiments, the previous reports of the researchers and the SOS response (DNA damage response) were reported by the researchers themselves and the results of the previous reports of the researchers, the results of the previous reports of the researchers themselves, the previous reports of the researchers themselves and the results of the previous reports of the researchers themselves and the response of the researchers themselves to the previous reports and the responses of the researchers themselves, the results of the previous reports and the results of the researchers' own reports on cell growth and cell growth were reported in the paper.