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二枚貝類における精子ミトコンドリアDNAが関連した生殖細胞分化と性決定機構の解明

阐明与双壳类精子线粒体 DNA 相关的生殖细胞分化和性别决定机制

基本信息

批准号：
08J05488
负责人：
小俣麻友 (小幡麻友)
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J05488/
关键词：
精子ミトコンドリア Doubly Uniparental Inheritance リアルタイムPCR in situ hybridization Cytochrome b mtDNA発現ムラサキイガイ DUI 生殖細胞 Vasa 精子ミトコンドリアDNA 始原生殖細胞 vasa

项目摘要

ムラサキイガイでは、精子mtDNA(M type)、卵mtDNA(F type)の二種類のmtDNAが同一個体に存在する。各組織において機能しているmtDNAはM type、F typeどちらかを明らかにするために、雌雄の足、鰓、唇弁、中腸腺、生殖巣におけるmtDNA量、発現量をリアルタイムPCRで定量した。またM type、F typeのcytochrome b領域に特異的なプローブを用いてISH染色を行い、各組織におけるM type、F typeの発現パターンを観察した。リアルタイムPCRの結果から、体細胞、雌生殖巣ではF type mtDNA量が優占し、主に発現していた。M typeはこれらの部位ではほとんど発現していなかった。一方、M typeは雄生殖巣のみで優占し、発現していた。各組織のmtDNA量、発現量から発現率を出した結果、雌生殖巣の発現率は他の組織と比べて有意に低かった。一方、雄生殖巣の発現率はF type、M type共に非常に高かった。ISH染色の結果から、F typeは体細胞、雌生殖巣で発現していた。特に消化管や唇弁上皮、生殖巣での強い発現が確認された。M typeの発現シグナルは雄生殖巣のみで観察された。特に精原、精母細胞で強い発現が観察された。以上の結果からムラサキイガイではF typeとM typeが組織によって機能分担していることが明らかになった。特に、M typeは初期精子形成過程において重要な機能を持つことが示唆された。また各組織によって発現率が異なっていたことから、ムラサキイガイでは組織やmtDNAの型の違いによって異なる転写制御を行っていることが示唆された。

There are two kinds of mtDNA in the same individual: sperm mtDNA(M type) and egg mtDNA(F type). The mtDNA content and expression of M type, F type, midgut gland, male and female foot, gills, labial gland and reproductive gland were quantified by PCR. In addition, ISH staining is performed using NAPRO cells specific to the M type and F type cytochrome b fields to observe the occurrence of M type and F type in various tissues. F-type mtDNA was found mainly in somatic cells and female reproductive cells. M type A side, M type male reproduction is preferred to occupy, appear in the middle The mtDNA quantity and expression rate of each tissue were significantly lower than those of other tissues. The reproduction rate of male and female is very high in F type and M type. ISH staining results show that F type somatic cells and female reproductive cells are present. In particular, it was confirmed that the digestive tract, labial epithelium and reproductive tract were strongly developed. M type of development, male reproduction, female reproduction In particular, spermatogonia and spermatocytes are strongly detected. As a result, F type and M type organizations share functions. The M type is important for the early stages of sperm formation. The expression rate of mtDNA varies from tissue to tissue. The expression rate of mtDNA varies from tissue to tissue.