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栄養膜幹細胞の分化におけるゲノムワイドなDNAメチル化解析

滋养层干细胞分化过程中的全基因组 DNA 甲基化分析

基本信息

批准号：
08J06912
负责人：
吉岡徹哉
金额：
$ 1.15万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2010
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒト、及びマウスの胎盤は栄養膜と脱落膜からなり、栄養膜は胎児組織を由来とする。栄養膜を構成する各種細胞への分化能を持つ培養細胞がマウスでは樹立されており、栄養膜幹細胞(TS細胞)という。TS細胞は遺伝子導入が困難であり、効率の高い遺伝子導入法は存在しなかった。従って、本年度はTS細胞およびその由来である胚盤胞の栄養外胚葉への遺伝子導入法の確立を試みた。その結果、TS細胞についてはエレクトロポレーションによる高効率な遺伝子導入が可能となり、また胚盤胞の栄養外胚葉についてはバキュロウイルスベクターによる遺伝子導入に成功した。一方で、マウスとヒトでは胎盤の発生形態が異なり、医学的応用を考えたときにはヒトにおける解析が望ましいが、ヒトではいまだTS細胞の樹立には至っていない。本研究においては、樹立に胎盤組織の供出を受ける必要がなく、遺伝子改変によらずに栄養膜細胞のモデルとなる培養細胞を得るため、ヒトiPS細胞から栄養膜細胞への分化誘導を試みた。ヒトiPS細胞をBMP4により処理した結果、ヒト胎盤のホルモンであるhCGβが発現している細胞が免疫染色により確認された。またRT-PCRによってCDX2を始めとする複数の栄養膜系譜のマーカーの発現が確認された。CDX2はヒトでは、妊娠第一三半期にのみ発現が見られ、ヒトTS細胞の転写ネットワークを構成する遺伝子の一つと言われている(Hemberger, M., et al.)。BMP4による分化で得られた集団は確かに栄養膜細胞系譜の細胞が存在し、その中にはTS細胞としての機能を備えた細胞が含まれている可能性がある。

ヒト, and びマウスのplacentaは栄nurturing membraneとshedding membraneからなり, 栄nurturing membraneはfetal tissueをoriginとする. The nutrient membrane is composed of various cells, the differentiation ability is maintained, the cultured cells are established, and the stromal membrane stem cells (TS cells) are established. However, it is difficult to introduce TS cells into cells, and there is no method for introducing TS cells into cells that is highly efficient.従って, this year's TS cell およびそのorigin であるblastoderm cells の栄raise ectodermal leaf への缝子 introductory method のestablishment を trial みた.そのRESULTS, TS cell についてはエレクトロポレーションによるHIGH EFFICIENCY な缝子 Introductionがとなり, またblastoderm cells and ectodermal leaves were successfully introduced. One side of the placenta, the placenta's birth form, the medical use of the placenta, the test of the placentaヒトにおけるanalyticsがwangましいが、ヒトではいまだTS cell のEstablishmentには to っていない. The purpose of this study is to establish the necessary conditions for the donation and delivery of placental tissue, and to improve the quality of postpartum fibrosis. The cells were cultured and the cells were cultured, and the iPS cells were cultured and the membrane cells were cultured and the cells were differentiated and induced. Results of ヒトiPS cells and BMP4 treatment and ヒトplacenta のホルモンであるhCGβが発appears and immunostaining of している cells and confirmation of された.またRT-PCRによってCDX2を开めとするplural の栄PF pedigree のマーカーの発appears がconfirmationされた. CDX2 はヒトでは, first and third half of pregnancy にのみ発appears が见られ, ヒトTS cell の転Hemberger, M., et al.). BMP4 has been differentiated and the cells are present in the trophic cell lineage.その中にはTS cells としてのFUNCTIONS えたcells がcontains まれているpossibility がある.