A new approach for sample preparation : expression and stable-isotope labeling of mature proteins using plant cells

样品制备的新方法：使用植物细胞表达和稳定同位素标记成熟蛋白质

• 批准号: 20510198
• 负责人: OHKI Shinya
• 金额: $ 3万
• 依托单位: Japan Advanced Institute of Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20510198/
• 关键词: タンパク質; 生体分子; バイオテクノロジー; ウイルス; 植物; 植物細胞; タンパク質発現; ウィルスベクター; 構造生物化学; NMR; 安定同位体標

We developed a novel protein expression method using plant cells and virus vector. We prepared a protein, which cannot be expressed with popular E.coli systems. We established a protocol for preparing the stable-isotope labeled proteins with this system. To show the workability, we performed protein expression, stable-isotope labeling, and structure determination of a protein, of which expression is tough. In summary, this work had suggested a new method, which has a potential to study challenging proteins, to prepare samples, of which expression is known as difficult.

我们开发了一种新的利用植物细胞和病毒载体表达蛋白的方法。我们制备了一种蛋白质，它不能用流行的大肠杆菌系统表达。我们建立了一套利用该系统制备稳定同位素标记蛋白质的方法。为了显示可操作性，我们进行了蛋白质表达，稳定同位素标记，和蛋白质的结构测定，其中表达是坚韧的。总之，这项工作提出了一种新的方法，它有可能研究具有挑战性的蛋白质，以制备样品，其中表达是已知的困难。

项目成果

Protein sample preparation with plant cells ; expression and labeling

用植物细胞制备蛋白质样品；

• 发表时间: 2010
• 作者: 大木進野;竹内誠;玉井淳史;森正之
• 通讯作者: 森正之

タンパク質試料調製技術の開発と評価

蛋白质样品制备技术的开发和评估

• 发表时间: 2009
• 作者: Furuta;T.;et al.;根木滋;大木進野
• 通讯作者: 大木進野

Solution structure of the inhibitory phosphorylation domain of myosin phosphatase targeting subunit 1.

• DOI: 10.1002/prot.22529
• 发表时间: 2009-11-15
• 期刊: PROTEINS-STRUCTURE FUNCTION AND BIOINFORMATICS
• 影响因子: 2.9
• 作者: Mori, Shunsuke;Iwaoka, Ryou;Eto, Masumi;Ohki, Shin-ya
• 通讯作者: Ohki, Shin-ya

Stable-Isotope Labeling using an Inducible Virus Vector and Suspension Cultured Plant Cells

使用诱导病毒载体和悬浮培养的植物细胞进行稳定同位素标记

• 发表时间: 2008
• 期刊: J.Biomol.NMR 42
• 作者: S.Ohki;K.Dohi;A.Tamai;M.Mori.
• 通讯作者: M.Mori.

Stable-Isotope labeling using plant cells and Inducible-virus vector

使用植物细胞和诱导病毒载体进行稳定同位素标记

• 发表时间: 2008
• 作者: 大木進野;土肥浩二;玉井淳史;竹内誠;森正之
• 通讯作者: 森正之