創傷歯髄で発現上昇するFIP-2が関与するサイトカイン産生ネットワークの解明

阐明涉及 FIP-2 的细胞因子产生网络，FIP-2 在受伤牙髓中表达增加

• 批准号: 20791385
• 负责人: 妹尾 京子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20791385/
• 关键词: 歯髄; 炎症; JNK; small interfering RNA

これまでに創傷歯髄の特徴を明らかにするために, ラットの創傷歯髄モデルを利用して, 創傷歯髄で発現が誘導される新規遺伝子γFIP-2の単離に成功し, その構造・発現解析結果を発表した。そこで申請者は, FIP-2が関与する歯髄炎症制御ネットワークを解明するために, 本年度は1. FIP-2の発現を誘導するシグナル伝達経路の探索, 2. FIP-2を発現抑制したラット歯髄由来細胞の樹立を行った。1. TNF-αで刺激した際のFIP-2の発現にどのようなシグナル伝達回路が関わっているか調べるために, NF-κB阻害剤, JNK阻害剤, ERK阻害剤を用いて検討を行った。10mMのJNK阻害剤を作用させた細胞において, FIP-2タンパクは減少していたが, NF-κB阻害剤, ERK阻害剤を作用させた細胞では阻害剤を作用させていないときと同程度であった。2. FIP-2に特異的なsmall interfering RNAを含む発現ベクターを, 培養歯髄線維芽細胞にリポフェクション法で遺伝子導入した。ピューロマイシンで選択培養を行いFIP-2を発現抑制した培養歯髄線維芽細胞を樹立した。発現抑制は定量PCR法およびウエスタンブロット法にて確認した。以上の結果から, FIP-2がTNF-αを始めとする炎症のシグナリングに関わっていることが解明された。また, FIP-2を発現抑制したラット歯髄由来細胞はFIP-2が関わる歯髄炎症ネットワークの解明に応用できる。

こ れ ま で に trauma 歯 marrow の, 徴 を Ming ら か に す る た め に, ラ ッ ト の trauma 歯 marrow モ デ ル を using し て, trauma 歯 marrow で 発 now が induced さ れ る new rules but 伝 son gamma FIP - 2 の 単 に し success, そ の structure, 発 now analytical results を 発 table し た. そ こ で applicants は, FIP - 2 が masato and す る 歯 marrow inflammation suppression ネ ッ ト ワ ー ク を interpret す る た め に, this year's は 1. FIP - 2 の 発 now を induced す る シ グ ナ ル 伝 経 road の exploration, 2. FIP - 2 を 発 now inhibit し た ラ ッ ト 歯 の marrow origin cells line set を っ た. 1. TNF alpha で stimulus し た interstate の FIP - 2 の 発 now に ど の よ う な シ グ ナ ル 伝 of loop が masato わ っ て い る か adjustable べ る た め に, nf-kappa B resistance against tonic, JNK resistance against tonic, ERK resistance against tonic を い て 検 line for を っ た. 10 mm の JNK resistance against tonic を role さ せ た cells に お い て, FIP - 2 タ ン パ ク は reduce し て い た が, nf-kappa B resistance against tonic, ERK resistance against tonic を role さ せ た cells で は resistance against tonic を role さ せ て い な い と き と with degree で あ っ た. 2. FIP - 2 に specific な small interfering RNA を containing む 発 now ベ ク タ ー を, cultivate 歯 marrow line d bud cells に リ ポ フ ェ ク シ ョ ン method で heritage 伝 son import し た. ピ ュ ー ロ マ イ シ ン で sentaku line cultivate を い FIP - 2 を 発 now inhibit し た cultivate 歯 marrow line d を bud cells establish し た. The occurrence inhibition is confirmed by <s:1> quantitative PCR method およびウエスタ ブロット ブロット method にて. Above results の か ら, FIP - 2 が TNF alpha を beginning め と す る inflammation の シ グ ナ リ ン グ に masato わ っ て い る こ と が interpret さ れ た. ま た, FIP - 2 を 発 now inhibit し た ラ ッ ト 歯 marrow origin cells は FIP - 2 が masato わ る 歯 marrow inflammation ネ ッ ト ワ ー ク の interpret に 応 with で き る.