Studies for mechanisms of bovine marbling and developments of genetic markers

牛大理石花纹机制研究和遗传标记的开发

• 批准号: 21580351
• 负责人: MIZOGUCHI Yasushi
• 金额: $ 3.16万
• 依托单位: Meiji University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21580351/
• 关键词: 遺伝子; 応用動物; ゲノム; 畜産学; 育種学

To investigate genes involved in ruminants intramuscular adipogenesis, sixteen target genes(8 up and 8 down regulated genes) with dramatically changed expression(P<10^<-12>) were selected between differentiation and proliferation phases libraries in our previous SAGE studies of a clonal bovine intramuscular preadipocyte(BIP) cell line(Mizoguchi, 2010), with reference to 3T3-L1 cell lines as monogastric animals. We harvested the BIP and 3T3-L1 cells 0, 3, 6, 9 and 12 days after adipogenic stimulation containing all-trans retinoic acid(RA), which inhibits preadipocyte differentiation in non-ruminants and measured the gene expression levels by quantitative real-time PCR and the accumulation levels of triglyceride(TG). Fourteen genes expression pattern of the 16 genes during adipogenesis were confirmed the SAGE studies. The expression pattern of eleven genes clearly differed between 3T3-L1 and BIP cells. Simultaneously, we investigated the profiles of target genes by RA. TG accumulation was significantly induced(P<0.05) in BIP cells whereas completely inhibited(P<0.05) in 3T3-L1 cells by RA at day 6 after adipogenic stimulation. RA induced the expression levels of six genes and suppressed these of eight genes at day 3 after adipogenesis in BIPs(P<0.05 ; respectively). The effect of ADFP down-regulation on the accumulation of TG was examined by transfecting the BIP cells with ADFP siRNA. The expression level of ADFP in the ADFP-siRNA transfected cells was 21.4% of that in the scr-siRNA transfected cells in BIP 3 days after induction(P<0.05). Also, 6 days after induction, the accumulation of TG in the ADFP-siRNA transfected cells was 20% less than in the control cells(P<0.001). Our findings of gene expression profiles by RA will cause a favorable and detailed understanding in the molecular mechanisms of bovine intramuscular adipogenesis.

为了研究参与反刍动物肌内脂肪形成的基因，<-12>在我们先前的克隆牛肌内前脂肪细胞（BIP）细胞系的SAGE研究（Mizoguchi，2010）中，参考作为单胃动物的3 T3-L1细胞系，在分化和增殖阶段文库之间选择具有显著变化的表达（P&lt;10 μ g）的16个靶基因（8个上调和8个下调基因）。我们收集了BIP和3 T3-L1细胞成脂刺激后0，3，6，9和12天，全反式维甲酸（RA），抑制前脂肪细胞分化的非反刍动物，并通过定量实时PCR和甘油三酯（TG）的积累水平的基因表达水平。SAGE研究证实了16个基因中14个基因在脂肪形成过程中的表达模式。11个基因的表达模式在3 T3-L1和BIP细胞之间明显不同。同时，我们还对RA靶基因的表达谱进行了研究。在成脂刺激后第6天，RA可显著诱导BIP细胞TG的积累（P&lt;0.05），而完全抑制3 T3-L1细胞TG的积累（P&lt;0.05）。RA诱导BIPs中6个基因的表达，并在成脂后第3天抑制8个基因的表达（P&lt;0.05 ;分别）。通过用ADFP siRNA转染BIP细胞来检查ADFP下调对TG积累的影响。在BIP中，转染ADFP-siRNA的细胞中ADFP的表达水平在诱导后3d为转染ADFP-siRNA的细胞的21.4%（P&lt;0.05）。诱导后6天，转染ADFP-siRNA的细胞中TG的积累比对照细胞减少20%（P&lt;0.001）。我们的研究结果的基因表达谱的RA将导致有利的和详细的了解牛肌内脂肪形成的分子机制。

项目成果

西表島に生息するリュウキュウイノシシの遺伝的多様性解析手法の開発

西表岛琉球公猪遗传多样性分析方法的开发

• 发表时间: 2011
• 期刊: 明治大学農学部研究報告
• 作者: 坪井一真;村上慶太朗;石垣長健;渡辺信;溝口康
• 通讯作者: 溝口康

但馬牛における経済形質に関わるゲノム解析～鶴山土井におけるQTLの効果検証

但马牛经济性状相关基因组分析——鹤山土居QTL效应验证

• 发表时间: 2010
• 期刊: 兵庫県農林水産技術総合センター研究報告
• 作者: 秋山敬孝;龍田健;溝口康;西村翔太;杉本喜憲
• 通讯作者: 杉本喜憲

DNAマーカーを指標とした牛の育種手法の開発に関する研究.岡山県基幹種雄牛「花茂勝2」におけるQTL領域の推定(第1報)

以DNA标记为指标的牛育种方法的开发研究，冈山县旗舰牛“花胜2号”的QTL区域估计（第1次报告）

• 发表时间: 2009
• 期刊: 岡山県総合畜産センター研究報告
• 作者: 中藤由紀;黒岩恵;馬場誠;溝口康;杉本喜憲
• 通讯作者: 杉本喜憲

雌豚繁殖形質とPROP1遺伝子多型を用いた相関解析

母猪繁殖性状与PROP1基因多态性的相关分析

• 发表时间: 2012
• 作者: T. Yamada;S. Sasaki;S. Sukegawa;T. Miyake;T. Fujita;H. Kose;M. Morita;Y. Takahagi;H. Murakami;F. Morimatsu;Y. Sasaki;溝口康
• 通讯作者: 溝口康

黒毛和種種雄牛におけるマイクロサテライトマーカーを用いたQTL(量的形質遺伝子座)の探索-気高系種雄牛CにおけるQTL領域の探索

使用微卫星标记在日本黑公牛中搜索 QTL（数量性状位点） - 在高贵公牛 C 中搜索 QTL 区域

• 发表时间: 2011
• 期刊: 鳥取県農林水産部農林総合研究所畜産試験場研究報告
• 作者: 久保田海雄;et al.;田淵一郎
• 通讯作者: 田淵一郎