Metabolism of benzoate in strictly anaerobic bacteria

苯甲酸盐在严格厌氧细菌中的代谢

• 批准号: 5380699
• 负责人: Professor Dr. Matthias Boll
• 金额: --
• 依托单位: Forschungsschwerpunkt Mikrobiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2001-12-31 至 2007-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5380699?language=en
• 关键词: Metabolism; benzoate; strictly; anaerobic; bacteria

Benzoyl-CoA ist ein zentrales Intermediat im Stoffwechsel anaerober, aromatenverwertender Bakterien; es wird durch das Schlüsselenzym Benzoyl-CoA Reduktase dearomatisiert. Das Enzym aus dem Denitrifizierer Thauera aromatica ist ein Eisen-Schwefel Protein, welches die Reduktion des aromatischen Ringes an eine stöchiometrische ATP-Hydrolyse koppelt. Aus energetischen Gründen muß die Reduktion des aromatischen Ringes in obligat anaeroben Bakterien wie Sulfatreduzierern oder Gärern nach einem anderen, bisher völlig unbekannten Mechanismus erfolgen. Diese Annahme wird unterstützt durch die Beobachtung, daß Sulfatreduzierer Selen und Molybdän für das Wachstum auf aromatischen Substanzen benötigen. Wir untersuchen die Schlüsselreaktion im Benzoatstoffwechsel des Gram-negativen Desulfococcus multivorans und in einer neu-isolierten Gram-positiven, thermophilen Desulfotomaculum-Art. Zu Beginn werden biochemische Untersuchungen zur Produktbildung aus [Ring-13/14C]-markiertem Benzoat mit HPLC-, Massenspektrometrie- und NMR-Techniken durchgeführt. Die Experimente werden zunächst mit Zellextrakten durchgeführt; langfristig ist eine Anreicherung/Reinigung des ringreduzierenden Enzyms geplant. Zur Identifizierung von Benzoat-induzierten, Se- und Mo-haltigen Enzymen werden beide Sulfatreduzierer auf Benzoat und auf nicht-aromatischen Substraten mit 75Se-Selenit und/oder 99Mo-Molybdat kultiviert. Nach zweidimensionaler gelelektrophoretischer Auftrennung werden Benzoat-induzierte/radioaktiv markierte Proteine N-terminal ansequenziert, was die Konstruktion von Gensonden zum Durchsuchen von geeigneten DNA-Banken ermöglicht.

苯甲酰-辅酶A在中部地区是厌氧剂、芳香剂和芳香剂的中间体；它们是Schlüssell酶的苯甲酰-辅酶A还原酶脱芳烃。在Eisen-Schwefel蛋白中，Das Enzym Aus Dm Fem Aromiizierer Ein Eisen-Schwefel Protein，Well die Reduktion des Aromatischen Ringes an eine st stöchiometrische ATP-Producse Kopelt。Aus Energy tischen Gründen Muüdie Reduktion des Aromatischen Ringes in债权厌氧菌Bakterien Wie Sulate redureduziern oder Gärern nach einem anderen，Bisher völlig unbekannten Machismus erfolgen.我们的工作将由以下几个方面进行：第一，第二，第二我们从革兰氏阴性杆菌和嗜热嗜热菌中分离出革兰氏阴性杆菌和嗜热硫杆菌。[环-13/14C]-标记MIT Benzoat MIT高效液相色谱-核磁共振-Techniken DurchgefüHRT。实验是由MIT ZellExtrakten DurchgefüHRT；Lang fristig is eine Anreicherung/Reinigung des ringreduzierenden Enzyms geants。苯硫酸盐和芳香族化合物的硫酸盐还原和芳香族化合物底物中的硒和钼的含量为75Se-Selenit和/或99Mo-Mo-Kultiviert。Nach zweiDimsionaler Gensonden zum Durchuchenen von Geeigneten DNA-Banken ermöglicht von Geeigneten DNA-Banken ermöglicht von Gensonden zum Durchuchenvon Geeigneten DNA-Banken ermöglicht。