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脂肪組織由来の幹細胞とアディポカインによる炎症と再生の双方向性制御

脂肪组织干细胞和脂肪因子对炎症和再生的双向控制

基本信息

批准号：
21592623
负责人：
橋川智子
金额：
$ 3万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

歯周組織における炎症制御および再生過程にアディポネクチンが及ぼす影響を解明することを目的として,歯周局所における炎症反応や免疫応答に積極的に関与することが知られている歯肉線維芽細胞に着目し,in vitroにて歯肉線維芽細胞の各種炎症性サイトカイン発現が,アディポネクチンによりどのように制御されるのか検討し,さらにその作用機序について詳細に解析した。次いで,歯周組織再生過程において重要な役割を果たすことが示されている歯根膜細胞をin vitroにて硬組織形成細胞への分化誘導を行い,その分化過程におけるアディポネクチンの作用について検討を行った。その結果、1)ヒト歯肉線維芽細胞,ヒト歯根膜細胞,マウス歯肉線維芽細胞中にAdipoR1, AdipoR2 mRNAおよび同タンパク発現を認めた。2)IL-1β刺激によるヒト歯肉線維芽細胞中のIL-6, TNFα, IL-β, IL-8mRNA発現上昇は,アディポネクチンにより抑制を認めた。MCP-1mRNA発現上昇には影響を認めなかった。その抑制効果はアディポネクチン濃度依存的であることが明らかとなった。さらにIL-1β刺激によるヒト歯肉線維芽細胞の培養上清中のIL-6, IL-8タンパク量の増加は,アディポネクチンにより抑制を認めた。3)1L-1β刺激によるマウス歯肉線維芽細胞中のIL-6mRNA発現上昇は,アディポネクチンにより抑制を認めた。その抑制効果はsi AdipoR1により減弱を認めたが,si AdipoR2においては影響を認めなかった。4)ヒト歯根膜細胞をアデイポネクチン含有石灰化誘導培地にて培養した場合,アディポネクチン非含有石灰化誘導培地にて培養した場合に比べ,アルカリフィスファターゼ活性の有意な増加を認め,ALP, RUNX2 mRNAの有意な発現上昇を認めた。さらに石灰化ノジュール形成の有意な亢進を認めた。

The aim of inflammation control and regeneration process in peripheral tissues is to understand the positive relationship between inflammation and immune response in peripheral tissues, and to understand the development of various inflammatory diseases in peripheral tissues. The detailed analysis of the action mechanism is carried out. In addition, the root membrane cells in vitro are induced to differentiate into hard tissue-forming cells, and the differentiation process is discussed. 1) AdipoR1, AdipoR2 mRNA and protein expression were identified in dental vascular bud cells, dental root membrane cells, and dental vascular bud cells. 2)IL-6, TNFα, IL-β, IL-8mRNA expression increased in cultured human umbilical cord cells stimulated by IL-1β, and the inhibition of IL-6, TNFα, IL-β, IL-8mRNA expression in cultured human umbilical cord cells was recognized. MCP-1mRNA expression increases in response to the effects of gene therapy. The inhibition effect is concentration-dependent IL-6 and IL-8 levels in cultured supernatant of cultured human umbilical cord cells stimulated by IL-1β increased, and the inhibition of IL-6 and IL-8 levels in cultured supernatant of cultured human umbilical cord cells was identified. 3) IL-6mRNA expression increased in cultured cells stimulated by 1L-1β, and was inhibited by 1 L-1 β. The inhibition effect is Si AdipoR1, Si AdipoR 2,Si AdipoR 1 and Si AdipoR2. 4) In the case of culture of root membrane cells containing calcareous induction medium, the activity of ALP, RUNX2 mRNA was intentionally increased when cultured without calcareous induction medium. The limestone is formed on purpose.