発生運命に関わるRNAのWnt依存的な非対称分配機構の解析

参与发育命运的RNA Wnt依赖性不对称分配机制分析

• 批准号: 09J02200
• 负责人: 高鳥 直士
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09J02200/
• 关键词: 細胞極性; 中胚葉; 内胚葉; mRNA結合タンパク質; PI3K; 発生運命; mRNA局在; 脊索動物; ホヤ; 転写因子ネットワーク; Wnt

動物の胚発生の過程で中胚葉と内胚葉は中内胚葉細胞から作られる。前年度までの研究で、脊索動物のホヤでは、中内胚葉細胞が極性化されており、将来中胚葉細胞になる側にNot mRNAが局在し、それが中胚葉細胞に受け継がれることで中胚葉と内胚葉の運命が分離されることを明らかにした。中内胚葉細胞に極性が生じる機構Not mRNAの局在が維持される機構の二つに着目した。中内胚葉細胞を極性化する機構については、極性を作るのに重要な因子を同定した。PI3Kの機能を阻害した胚では、Not mRNAが細胞の中央に局在し、中胚葉と内胚葉の両方の細胞に均等に分配され、運命が分離しなかった。PI3Kの抗体を作成し、免疫抗体染色を行ったところ、PI36とその産物である、PtdIns(3,4,5)P3の両方が将来の中胚葉側に局在していた。PI3K活性の偏りを乱すために、PtdIns(3,4,5)P3を分解するPTENの機能を阻害したところ、Not mRNAの局在が乱れ、運命分離が起こらなかった。PI3Kを過剰に発現させた胚でもNot mRNAの局在が阻害された。PtdIns(3,4,5)P3を中内胚葉細胞に注入したところ、Not mRNAは中胚葉側ではなく、細胞の中央に局在した。これらの結果は、PI3Kおよびその活性の局在が極性を作るのに重要であることを支持している。Not mRNAの局在に必要なmRNA結合因子を同定するために、Yeast three hybrid法により、20の候補因子を得た。2つについては機能阻害した胚でNot mRNAの分配が異常になった。1つの因子について抗体を作成して中内胚葉細胞における局在を観察したところ、細胞核と中胚葉側の細胞表層付近にシグナルが観察された。現在、これらの因子の機能と局在を検証する作業を継続している。

The process of embryogenesis in animals で the blastoderm と the endoblastoderm the endoblastoderm cells ら られる. Before the annual ま で の research で, chordate の ホ ヤ で は, medium in embryo cells が polarity さ れ て お り, future mesoderm cells に な る side に Not mRNA in し が bureau, そ れ が に mesoderm cells by け 継 が れ る こ と で mesoderm と germ layer in の luck が separation さ れ る こ と を Ming ら か に し た. The に polar が generating じる mechanism Not mRNA <s:1> in the endodermal cells maintains される mechanism <e:1> in が, に に に watch た た. Germ layer within cells を polarization す る institutions に つ い て は, polarity を る の に な important factor を with fixed し た. Function of PI3K の を resistance against し た embryo で は, Not mRNA が cells の central に bureau in し, mesoderm と germ layer in の struck party の cells に に equal distribution さ れ, luck が separation し な か っ た. PI3K を into し の antibody, immune antibody staining line を っ た と こ ろ, PI36 と そ の product で あ る, PtdIns (three, four, five) P3 の struck party が future の lateral mesoderm に bureau in し て い た. PI3K active の partial り を disorderly す た め に, PtdIns (three, four, five) P3 を decomposition す る PTEN の function を resistance against し た と こ ろ, Not mRNA の bureau in が れ disorderly, luck separation が こ ら な か っ た. PI3Kを passes through に to develop させた embryo で <s:1> Not mRNA, which is blocked by が and された. PtdIns (three, four, five) P3 を に germ layer cells within the injection し た と こ ろ, Not mRNA は lateral mesoderm で は な く, cell の bureau of the central に in し た. こ れ ら の results は, PI3K お よ び そ の active の bureau in が polarity を る の に important で あ る こ と を support し て い る. The Not mRNA sequence is determined by に necessary なmRNA binding factor を するために, Yeast three hybrid method によ, and 20 <s:1> alternate factor を to た. The function of 2 に に に て て hinders abnormal が distribution of <s:1> た embryo でNot mRNA になった になった になった. 1 つ の factor に つ い て antibody を made し て in germ layer cells に お け る bureau in を 観 examine し た と こ ろ, nucleus と lateral mesoderm の cell surface paying nearly に シ グ ナ ル が 観 examine さ れ た. Now, the <s:1> れら <s:1> factor <e:1> function と bureau is operating on the を検 certificate する, を継続 て て る る る.

项目成果

The mechanism of polarized nuclear migration that separates mesoderm and endoderm fates in ascidian embryos

海鞘胚胎中分化中胚层和内胚层命运的极化核迁移机制

• 发表时间: 2011
• 作者: Nobuhiro Mifune;Hirofumi Hashimoto;Toshio Yamagishi;Naohito Takatori
• 通讯作者: Naohito Takatori

A Maternal Factor Unique to Ascidians Silences the Germline via Binding to P-TEFb and RNAP II Regulation

• DOI: 10.1016/j.cub.2011.06.050
• 发表时间: 2011-08-09
• 期刊: CURRENT BIOLOGY
• 影响因子: 9.2
• 作者: Kumano, Gaku;Takatori, Naohito;Nishida, Hiroki
• 通讯作者: Nishida, Hiroki

Tissue-specific regulation of the number of cell division rounds by inductive cell interaction and transcription factors during ascidian embryogenesis

• DOI: 10.1016/j.ydbio.2011.04.033
• 发表时间: 2011-07-15
• 期刊: DEVELOPMENTAL BIOLOGY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Fujikawa, Tetsuya;Takatori, Naohito;Nishida, Hiroki
• 通讯作者: Nishida, Hiroki

Wnt-dependent asymmetric partitioning of Not mRNA segregates mesoderm and endoderm fates in ascidian embryos

Not mRNA 的 Wnt 依赖性不对称分配分离了海鞘胚胎中中胚层和内胚层的命运

• 发表时间: 2009
• 作者: Kobayashi;M.;Hiroki Nishida;Gaku Kumano;Naohito Takatori
• 通讯作者: Naohito Takatori

Wnt5 is required for notochord cell intercalation in the ascidian Halocynthia roretzi.

• DOI: 10.1042/bc20090042
• 发表时间: 2009-08-25
• 期刊: Biology of the cell
• 影响因子: 2.7
• 作者: Niwano T;Takatori N;Kumano G;Nishida H
• 通讯作者: Nishida H