自己肝温存同所性部分肝移植と組織幹細胞移植併用による自己残肝再生促進効果

自体保肝原位部分肝移植与组织干细胞移植联合促进自体残余肝再生的效果

• 批准号: 21791256
• 负责人: 山之内 孝彰
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21791256/
• 关键词: 細胞移植; 肝移植; 多能性幹細胞; 肝再生

目的:自己肝温存同所性部分肝移植(auxiliary partial orthotopic liver transplantation:APOLT)モデルのラットに対して、自己脂肪組織から分離した多能性幹細胞を自己残肝に移植し、自己残肝の再生および機能回復を促す。上記実験に先立ち、同種成熟肝細胞移植の障害肝に対する置換効果を検討した。(方法) マーカーとしてレシピエントにDPPIV(-)、ドナーにDPPIV(+)ラットを用いた。レシピエントラットの肝前葉にX線50Gyを照射し障害を与え、再生刺激として肝右中葉(全肝の約20%)へ向かう門脈の枝を結紮した。その後、ドナーラットから、コラゲナーゼ還流法にて分離した成熟肝細胞を経門脈的に移植した。(結果) 移植8週後、摘出肝のDPPIV組織染色では、赤く染まるドナー由来肝細胞が著明に増殖し、レシピエント肝細胞の80%以上を置換していた。さらにドナー由来の肝細胞は、PAS染色ではゴリコーゲンが、免疫染色では糖新生関連酵素であるPCK-1、肝細胞間gap結合に特異的なコネキシン32が正常肝と同様に発現していることが確認された。(結語) 移植された成熟肝細胞は、レシピエントの障害肝において、増殖刺激の存在下にレシピエント肝細胞を置換するまでに著明な増殖を認めた。さらに、移植肝細胞は、正常肝細胞と同様にグリコーゲン貯蔵や糖新生酵素の発現を認め、正常のgap結合を構築しつつ増殖していることが明らかとなった。多能性幹細胞はin vitro、in vivoで肝細胞様細胞に分化することが知られている。APOLTモデルに対する多能性幹細胞移植により、自己残肝の再生促進や正常な機能回復を得られる可能性が示唆された。

Objective: To study the effect of autologous partial orthotopic liver transplantation (APOLT) on the recovery of liver function and the regeneration of residual liver by isolating pluripotent stem cells from subcutaneous fat. In this paper, we discuss the effect of transplantation on liver dysfunction caused by transplantation of allogeneic mature hepatocytes (Method) DPPIV(-), DPPIV(+) X-ray irradiation of 50Gy to the anterior lobe of the liver damaged the right middle lobe of the liver (about 20% of the whole liver) and ligated the branches of the portal vein After transplantation, mature hepatocytes were isolated and transplanted into the portal vein. Results: Eight weeks after transplantation, DPPIV staining showed that more than 80% of hepatocytes were replaced by DPPIV staining. In addition, PAS staining was used to detect the expression of PCK-1 and gap binding between hepatocytes, and the expression of PCK-1 and gap binding between hepatocytes and normal liver was confirmed. (Conclusion) Transplantation of mature hepatocytes in the presence of growth stimulation in the liver injury, liver cell replacement and proliferation recognition. In addition, transplanted liver cells and normal liver cells are similar to each other, and the expression of glycogen-producing enzymes is recognized. Normal gap binding is constructed. Pluripotent stem cells are in vitro, in vivo, and differentiated into hepatocytes. APOLT-related pluripotent stem cell transplantation, promotion of liver regeneration, and restoration of normal liver function have been demonstrated.