蛍光イメージング法を用いた細胞内アミノ酸レベルの解析

荧光成像法分析细胞内氨基酸水平

• 批准号: 10J05229
• 负责人: 森下 英晃
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J05229/
• 关键词: アミノ酸; オートファジー; オルガネラ分解; 水晶体; 蛍光イメージング

アミノ酸はタンパク質や核酸の材料やエネルギー源として必須な栄養素である。しかし一方で、アミノ酸はタンパク質合成、細胞増殖、オートファジー等を直接制御していることも明らかになっている。しかしアミノ酸が生体内の生理的な条件下でいつ、どこで、どのように変動しているかは全く不明である。本研究では細胞内アミノ酸レベルを可視化する方法を開発すると同時に、生体内の生理的アミノ酸変動モデルを確立することを目的とする。本年度も、アミノ酸検出プローブの作製を進めると同時に、生体内でアミノ酸レベル変化を伴うことが予想されるモデルとして水晶体の解析を行った。水晶体は単一の細胞(線維細胞)から構成されるため、組織内のアミノ酸変動解析に適した組織である。さらに水晶体は血管を持たないため、特にオートファジーによる細胞内からのアミノ酸産生が重要と考えられた。そこで水晶体特異的オートファジー(Atg5およびPik3c3)欠損マウスを作製し解析した結果、オートファジーは水晶体細胞内で恒常的に活性化しており、その作用は加齢性白内障の抑制に必須であること、さらに水晶体細胞の最終分化過程で起きるオルガネラ分解はオートファジーに依存しないことが明らかとなった。水晶体細胞内のアミノ酸レベルの変動およびオートファジーの寄与については今後解析予定である。今回明らかになったオートファジー非依存的オルガネラ分解系についても詳細な解析を進めており、水晶体内のアミノ酸ダイナミクスとの関連性も明らかにしたいと考えている。

ア ミ ノ acid は タ ン パ ク qualitative や nucleic acid の material や エ ネ ル ギ ー source と し て must な tech students.their ownship raise grain で あ る. し か し で, ア ミ ノ acid は タ ン パ ク qualitative synthesis, cell raised colonization, オ ー ト フ ァ ジ ー を such as direct suppression し て い る こ と も Ming ら か に な っ て い る. し か し ア ミ ノ acid が の gave birth to the body under the condition of physical な で い つ, ど こ で, ど の よ う に - move し て い る か は く all unknown で あ る. This study で は intracellular ア ミ ノ acid レ ベ ル を visualization す る method を open 発 す る と に at the same time, the body の physiological ア ミ ノ acid - move モ デ ル を establish す る こ と を purpose と す る. This year も, ア ミ ノ the acid 検 プ ロ ー ブ を into the の cropping め る と に at the same time, the body で ア ミ ノ acid レ ベ ル variations change を with う こ と が to think さ れ る モ デ ル と し analytical line を っ て crystalline の た. The lens 単 単 a first stage cell (linear cell) ら constitutes されるため, and the acid changes within the tissue <s:1> ア ノ ノ analysis に suitable for the た tissue である. さ ら に crystalline は vascular を hold た な い た め, に オ ー ト フ ァ ジ ー に よ る intracellular か ら の ア ミ ノ acid produced important と が exam え ら れ た. そ こ で crystalline specific オ ー ト フ ァ ジ ー (Atg5 お よ び Pik3c3) owe loss マ ウ ス を cropping し parsing し た results, オ ー ト フ ァ ジ ー は crystalline cells within で constant に activeness し て お り, そ の role は plus 齢 cataract の must suppress に で あ る こ と, さ ら に の finally the cells differentiation で up き る オ ル ガ ネ Youdaoplaceholder0 decomposes ら and ラ トファジ and に に and に and に dependencies and とが and ら and となった. In the crystal cells, the <s:1> ア, ノ, レベ, レベ, <s:1> of acids レベ, <s:1> changes および, <s:1>, トファジ, <s:1> are sent to に, に, て, て, て for future analysis and determination of である. This HuiMing ら か に な っ た オ ー ト フ ァ ジ ー of interdependent オ ル ガ ネ ラ decomposition is に つ い て も detailed analytical を な into め て お り, crystal body の ア ミ ノ acid ダ イ ナ ミ ク ス と の masato even sex も Ming ら か に し た い と exam え て い る.

项目成果

水晶体におけるオートファジーの生理的意義と白内障との関連

晶状体自噬的生理意义及其与白内障的关系

• 发表时间: 2013
• 作者: 森下英晃;酒巻有里子;水島昇
• 通讯作者: 水島昇

オートファジーの制御機構と生理機能

自噬的控制机制和生理功能

• 发表时间: 2012
• 期刊: 生体の科学
• 作者: 森下英晃;水島昇
• 通讯作者: 水島昇

オートファジーと疾患

自噬与疾病

• 发表时间: 2013
• 作者: 柏原克彦;伊村智;長沼毅;吉森 保
• 通讯作者: 吉森 保

水晶体オルガネラ分解過程におけるリソソームの関与

溶酶体参与晶状体细胞器降解过程

• 发表时间: 2012
• 作者: 森下英晃;江口賢史;木村洋貴;佐々木純子;酒巻有里子;Robinson ML;佐々木雄彦;水島昇;森下英晃
• 通讯作者: 森下英晃

Autophagy-related 5 (Atg5) and Pik3C3 (Vps34) are not essential for the programmed organelle degradation, but important for the quality control and development of the lens, respectively.

自噬相关 5 (Atg5) 和 Pik3C3 (Vps34) 对于程序性细胞器降解不是必需的，但分别对于晶状体的质量控制和发育很重要。

• 发表时间: 2012
• 作者: 森下英晃;江口賢史;木村洋貴;佐々木純子;酒巻有里子;Robinson ML;佐々木雄彦;水島昇
• 通讯作者: 水島昇