非コードRNA Xistを制御するタンパク質複合体の探索

点击翻译按钮获取中文摘要

本研究では哺乳類雌におけるX染色体不活性化に着目し、この現象の必須因子であるノンコーディングRNAの一種、Xist RNAの制御機構解明を通じ、新たな側面からエピジェネティクスを理解することを目指した。昨年度までに研究代表者は、Xist RNA局在制御因子としてRNA結合タンパク質hnRNP Uを見出しており、分子生物学的手法を用いてhnRNP UとXist RNAとの相互作用を検証し、hnRNP UがX染色体不活性化に必須であることを明らかにした。これらの研究成果はDevelopmental Cell誌に発表した。本年度はXist RNAとhnRNP Uの相互作用のより詳細な解析を行った。また、siRNAライブラリを用いて新奇Xist RNA制御因子の探索を行った。研究成果について、以下に示す。1.Xist RNA上のhnRNP U結合領域を絞り込んだ2.hnRNP UのRNA結合ドメイン内のXist RNAとの相互作用に必要な領域を絞り込んだ3.エピジェネティックな遺伝子発現制御に関わることが示唆されている他の長鎖ノンコーディングRNAについて、Xist RNAと同様にhnRNP Uによる制御を受けていることを明らかにした4.siRNAライブラリによるノックダウンとqPCR法を組み合わせたスクリーニングにより、RNAヘリカーゼの一種がXist RNAの量的制御に関与している可能性を見いだした3の研究成果については特に特筆すべきであり、これはhnRNP UによるXist RNA制御機構がX染色体不活性化のみならず、他の生命現象に対してもより一般的に使われている可能性を示唆するものである。本研究は、ノンコーディングRNAを通じたエピジェネティックな遺伝子発現制御機構の詳細解明に大きく貢献したものと考える。