プロビデンシア・アルカリファシエンスが産生する細胞膨化致死毒素に関する研究

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P.alcalifaeiensは腸内細菌科に属するグラム陰性桿菌である。1996年に福井県で発生した原因不明の集団食中毒事例の際に、P.alcalifaciensが原因菌として分離・同定され、本菌が単独で下痢症の起因菌となることが明らかとなった。本菌の病原発現機構として細胞侵入性が報告されているが、細胞侵入性を持つ株は下痢症患者から単離されるP.alcalifaciensの一部であり、細胞侵入性を持たない株の病原性については不明である。これまでの研究でP.alcalifaciensが細胞毒性を有する新規のCDT(PaCDT)を産生することを明らかとし、CDTがP.alcalifaciensの病原因子となる可能性を示した。また、PaCDTはCHO細胞に対して細胞毒性を示す一方、大腸菌のCDT-I(EcCDT-I)に対する感受性の高いHeLa細胞には細胞毒性を示さず、PaCDTとEcCDTでは細胞毒性発現機構に違いがある可能性が考えられた。この細胞毒性の違いがCDTのどの構造に由来するかを調べるために、CDTの特異性に関わるサブユニットの同定を試みた。これまでに作製した組換えProvidencia alcalifaciens CdtA(PaCdtA),PaCdtB,PaCdtCに加え、組換え大腸菌Cdt-IA(EcCdt-IA),EcCdt-IB,EcCdt-ICを作製した。作製した組換えCdtサブユニットからPaCDTとEcCDT-Iの各種キメラホロ毒素を再構成しHeLa細胞とCHO細胞に対する細胞毒性を調べ、細胞感受性に最も影響を及ぼすサブユニットはAサブユニットであることまた、細胞との結合に関与するA、Cサブユニットだけでなく、Bサプユニットも細胞感受性に影響を与えることを見いだし、現在論文を作成中である。