Fluorescent visualization of cancer cellsby monitoring cellular polyamines

通过监测细胞多胺实现癌细胞的荧光可视化

• 批准号: 22501019
• 负责人: MATSUFUJI Senya
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22501019/
• 关键词: がんの特性; ポリアミン; 翻訳調節; 蛍光タンパク質; アンチザイム; がん細胞の特性

We are developing a novel method to visualize cancer cells by combining the polyamine-dependent frameshift mechanism of AZ, an endogenous cellular polyamine sensor, and the fluorescent protein techniques. We created a polyamine sensor construct with frameshift region of AZ1 mRNA flanked by two fluorescent proteins (ECFP and Keima-Red). When the construct was transfected into the cells, however, polyamine-dependent increase of Keima-Red fluorescence was not observed. Therefore, we improved the sensor construct using the entire protein coding region of AZ1 mRNA with EGFP gene that is inserted immediately downstream of the pseudoknot structure. Cells transfected with this construct showedpolyamine-dependent increase of EGFP fluorescence and frameshift product. Further analysis of polyamine response in the cells is continued.

我们正在开发一种新的方法来可视化癌细胞结合AZ，内源性细胞多胺传感器，和荧光蛋白技术的多胺依赖性移码机制。我们创建了一个多胺传感器构建体，其中AZ 1 mRNA的移码区两侧是两个荧光蛋白（ECFP和Keima-Red）。然而，当将构建体转染到细胞中时，未观察到Keima Red荧光的多胺依赖性增加。因此，我们使用AZ 1 mRNA的整个蛋白质编码区与EGFP基因改进了传感器构建体，所述EGFP基因被插入到假结结构的紧下游。转染该构建体的细胞显示EGFP荧光和移码产物的多胺依赖性增加。细胞中多胺反应的进一步分析继续进行。

项目成果

Protocols for Studying Antizyme Expression and Function

• DOI: 10.1007/978-1-61779-034-8_15
• 发表时间: 2011-01-01
• 期刊: POLYAMINES: METHODS AND PROTOCOLS
• 作者: Murai, Noriyuki;Murakami, Yasuko;Matsufuji, Senya
• 通讯作者: Matsufuji, Senya

動物細胞におけるポリアミン恒常性の維持機構-アンチザイムを中心に-

动物细胞多胺稳态的维持机制-聚焦抗酶-

• 发表时间: 2013
• 作者: Matsui Y;Amano H;Ito Y;Eshima K;Suzuki T;Ogawa F;Iyoda A;Satoh Y;Kato S;Nakamura M;Kitasato H;Narumiya S;Majima M;村井法之
• 通讯作者: 村井法之

Autoregulatory frameshifting in antizyme gene expression governs polyamine levels from yeast to mammals, in Atkins JF, Gesteland RF eds Recoding: Nucleic Acids and Molecular Biology

抗酶基因表达中的自动调节移码控制从酵母到哺乳动物的多胺水平，参见 Atkins JF、Gesteland RF 编辑重新编码：核酸和分子生物学

• 发表时间: 2010
• 作者: Ivanov IP;Matsufuji S
• 通讯作者: Matsufuji S

Regulation of c-Myc by antizyme 2 and its biological significance

抗酶2对c-Myc的调控及其生物学意义

• 发表时间: 2011
• 作者: Imoto A;Okada M;Okazaki T;Kitasato H;Harigae H;Takahashi S;松藤千弥
• 通讯作者: 松藤千弥

細胞内ポリアミン濃度の変動と維持

细胞内多胺浓度的波动和维持

• 发表时间: 2011
• 作者: Mimata. A.;Fukamachi;H.;Eishi;Y.;and Yuasa;Y.;Shinohara Masahiro;松藤千弥
• 通讯作者: 松藤千弥