ヒト多能性幹細胞由来分化網膜細胞の神経機能解析

人多能干细胞分化视网膜细胞的神经功能分析

• 批准号: 22791701
• 负责人: 本間 耕平
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22791701/
• 关键词: 網膜移植治療; 網膜視細胞分化; 網膜色素変性症; 網膜加齢黄班変性症

本研究は,網膜色素変性症,加齢黄班変性症をターゲットにした網膜細胞移植治療の確立に向けた基礎研究である.現在までにマウス網膜視細胞前駆細胞を網膜変性モデルマウスに移植することで視機能が一部回復したという報告があるが,移植された細胞が実際の視細胞としての役割を果たしているかどうかはあきらかではない.また,移植するドナー細胞として,胚性幹細胞(ES細胞)や人工多能性研細胞(iPS細胞)から分化させた網膜視細胞前駆細胞が同様の働きをするかについてはあきらかではない.そこで,網膜桿体視細胞前駆細胞が選択的にGFPでラベルされたトランスジェニックマウス(NrlGFPマウス)を用いて,この網膜視細胞前駆細胞を網膜変性モデルマウスである,rdlマウスに移植し,2週間後の移植細胞の神経活動を,カルシウムイメージング法とパッチクランプ法によって解析した.移植された網膜前駆細胞は2週間後観察すると,網膜視細胞様に分化しており,網膜2次ニューロンである,網膜双極細胞をシナプス結合していることが分かった.また,脱分極刺激に対して内在性の視細胞と同等のカルシウム応答を示すことが分かった.また,移植細胞は網膜視細胞に特異的な過分極誘導性電流を示すことがわかった.さらに我々は,NrlGFPマウスからiPS細胞を作製し,iPS細胞からGFP陽性の網膜視細胞前駆細胞を作製することに成功した.この細胞は,網膜視細胞に特異的に発現する,ロドプシン,リカバリンなどのタンパク質を発現し,NrlGFPマウスから得られた網膜前駆細胞と同様の過分極誘導性電流を示すことがわかった.このことから,iPS細胞由来の網膜視細胞前駆細胞は網膜視細胞移植のドナー細胞に用いることができる可能性が見出された.

は, retinal pigment - sex disease, add 齢 yellow class - sexual disease を タ ー ゲ ッ ト に し た retinal cell transplantation therapy の establish に to け た basic research で あ る. Now ま で に マ ウ ス retinal cells front 駆 を retinal cells - sex モ デ ル マ ウ ス に transplantation す る こ と で visual function が a reply し た と い う report が あ る が, transplant さ れ が た cells be interstate の visual cell と し て の "を cut fruit た し て い る か ど う か は あ き ら か で は な. い ま た, transplant す る ド ナ ー cells と し て, embryonic stem cells (E S や artificial pluripotent cells) research cells (iPS cells) か ら differentiation さ せ た retinal cells front が 駆 cells with others の 働 き を す る か に つ い て は あ き ら か で は な い. そ こ で, retinal cells front rod body 駆 cells が sentaku に of GFP で ラ ベ ル さ れ た ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス (NrlGFP マ ウ ス) を with い て, こ の Retinal cells front 駆 を retinal cells - sex モ デ ル マ ウ ス で あ る, RDL マ ウ ス し に transplantation, 2 weeks after の transplanted cells の を 経 activity, god カ ル シ ウ ム イ メ ー ジ ン グ method と パ ッ チ ク ラ ン プ method に よ っ て parsing し た. は 駆 before transplantation さ れ た retinal cells after 2 weeks 観 examine す る と, retinal cells depending on others に differentiation し て お り, retinal twice ニ ュ ー ロ ン で あ る, retinal bipolar cells を シ ナ プ ス combining し て い る こ と が points か っ た. ま た, take off points very stimulating に し seaborne て internality の cell と equal の カ ル シ ウ ム 応 answer を shown す こ と が points か っ た. ま た, transplant Cells は retinal visual に specific な を too extremely induced current in す こ と が わ か っ た. さ ら に I 々 は, NrlGFP マ ウ ス か ら し the iPS cells を cropping, iPS cells か ら GFP positive の retinal cells front 駆 cells を cropping す る こ と に successful し た. こ は の cells, retinal visual cell に specific に 発 now す る, ロ ド プ シ ン, リ カ バ リ ン な ど の タ ン パ ク qualitative を 発 し, NrlGFP マ ウ ス か ら have ら れ た と 駆 before retinal cells with others の を too extremely induced current in す こ と が わ か っ た. こ の こ と か ら, iPS cells origin の retinal cells front 駆 は retinal cells depending on cell transplantation の ド ナ ー cells に using い る こ と が で き る が likely see a さ れ Youdaoplaceholder0.

项目成果

Measurement Of Neuronal Activities Of Transplanted Retinal Cells In Retinal Degeneration Models

视网膜变性模型中移植视网膜细胞神经元活动的测量

• 发表时间: 2010
• 作者: Kohei Homma;Zi-Bing Jin;Michiko Mandai;Masayo Takahashi
• 通讯作者: Masayo Takahashi

網膜変性マウスにおける移植網膜視細胞の神経活動

视网膜变性小鼠移植视网膜感光细胞的神经活性

• 发表时间: 2010
• 作者: 本間耕平;万代道子;金子兵;高橋政代
• 通讯作者: 高橋政代

Neuronal activities of transplanted retinal cells in retinal degeneration models

视网膜变性模型中移植视网膜细胞的神经元活性

• 发表时间: 2010
• 作者: Kohei Homma;Satoshi Okamoto;Michiko Mandai;Masayo Takahashi
• 通讯作者: Masayo Takahashi

網膜変性マウスにおける移植網膜視細胞の神経活動計測

视网膜变性小鼠移植视网膜感光细胞神经活动的测量

• 发表时间: 2010
• 作者: 本間耕平;万代道子;高橋政代
• 通讯作者: 高橋政代