Functional characterization of surface protein-modifying enzymes encoded by a potential pathogenicity island within the Streptococcus pyogenes genome

化脓性链球菌基因组内潜在致病岛编码的表面蛋白修饰酶的功能表征

• 批准号: 5399048
• 负责人: Professor Dr. Andreas Podbielski
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Medizinische Mikrobiologie, Virologie und Hygiene
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2006-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5399048?language=en
• 关键词: Functional; characterization; surface; protein; modifying

Gruppe A-Streptokokken (GAS) tragen in ihrem Genom den FCTLokus (fibronectin-/collagen-binding proteins, T-antigen), der neben Genen für Oberflächen-gebundene Adhäsine und globale Negativregulatoren offenbar auch Gene für eine Signalpeptidase I (LepB) und eine Sortase (SrtB) enthält. Der FCT-Lokus variiert in seiner Struktur zwischen verschiedenen GAS-Serotypen, ist aber in jedem Fall von konservierten Genomabschnitten umgeben. Er kann daher als erste Pathogenitätsinsel der GAS betrachtet werden. Im vorliegenden Antrag soll zunächst die Enzymfunktion von LepB und SrtB mittels gereinigter rekombinanter Proteine, spezifischen knock-out Mutanten bzw. heterologer Expression in anderen Streptokokkenstämmen belegt werden. Dabei soll auch gezeigt werden, dass diese Enzyme spezifisch die in der FCT-Region kodierten Oberflächenproteine prozessieren und neben den üblichen, auf andere Oberflächenproteine wirkenden Enzymen in GAS vorkommen. Die Regulation von lepB und srtB wird mittels Reportergenfusionen, die Auswirkung der beiden Gene auf die Genomexpression mittels RNA-Hybridisierungen mit DNA-Arrays verfolgt. Schließlich werden biologische Konsequenzen der LepB- und SrtB-Aktivität wie Wachstums- und Oberflächeneigenschaften und Folgen für das Virulenzverhalten in Epithelzellkulturen erfaßt. Mit der geplanten Charakterisierung wird ein Grundstein für die Entwicklung neuartiger, mit der GAS-Virulenz interferierender Substanzen gelegt.

A型链球菌（GAS）群在FCTLokus（纤连蛋白/胶原结合蛋白，T抗原）基因组中的作用，该基因可用于Oberflächen-gebundene Adhäsine und globale Negativregulatoren offenbar auch Gene für eine Signalpeptidase I（LepB）und eine Sortase（SrtB）enthält。FCT-Lokus在GAS-血清分型的结构上的变化，是由基因组学的一致性引起的。他首先是气体韦尔登的病原体。In vorliegenden Antrag soll zunächst die Enzymfunktion von LepB und SrtB mittels gereinigter rekombinanter Proteine，spezifischen knockout Mutanten bzw.异源基因在链球菌中的表达属于韦尔登。Dabei也可以韦尔登，这种酶在FCT区域中的特异性可用于OberflächenProteine prozessieren和neben den üblichen，以及GAS中的OberflächenProteine可用于酶。lepB和srtB的调控机制可用于报道融合，外源基因的筛选和基因表达的研究可通过DNA微阵列技术进行RNA杂交。Schließlich韦尔登生物学Konsequenzen der LepB- und SrtB-Activität wie Wachstums- und Oberflächeneigenschaften und Folgen für das Virulenzverhalten in Epithelzellkulturen erfaßt. Mit der geplanten Charakterisierung wird ein Grundstein für die Entwicklung neuartiger，mit der GAS-Virulenz interferierender Substanzen gelegt.